放疗联合Erb-(IL10)2治疗恶性黑色素瘤的效果及其机制研究

摘要

目的：
　　局部高剂量放疗能够有效杀死肿瘤细胞，改变肿瘤微环境，影响宿主的抗肿瘤免疫力。白细胞介素-10（IL-10）通常被认为是免疫系统的负性调节剂。然而，在小鼠中局部给予高浓度的IL-10能够清除肿瘤细胞并且能抑制肿瘤转移。将抗表皮生长因子受体（EGFR）抗体和IL-10连接在一起的异二聚体融合蛋白Erb-(IL10)2，其能够通过靶向肿瘤过度表达的EGFR将IL10局部运输到肿瘤微环境中发挥抑制肿瘤生长作用。我们假设放疗联合Erb-(IL10)2在过表达EGFR的小鼠恶性黑素瘤模型中具有协同抗肿瘤作用。
　　方法：
　　通过C57BL/6小鼠两侧腹部皮下接种 B16-EGFR-SIY细胞建立鼠源性恶性黑色素瘤模型，给予单次剂量照射和/或Erb-(IL10)2、对照抗体来评价放疗联合Erb-(IL10)2的治疗作用。通过评估监测治疗后肿瘤生长、副作用、免疫学参数来研究其联合治疗的潜在机制。
　　结果：
　　随着剂量从5Gy增加到30Gy，局部单次照射抑制肿瘤生长的能力随之增加。局部单次照射10Gy对未照射侧肿瘤无生长抑制作用。相反，单次放疗10Gy联合Erb-(IL10)21mg/kg治疗不仅对照射侧原位肿瘤生长具有协同效应（P=0.0349）。而且，与单一治疗相比，联合治疗能更显著地抑制远位未照射肿瘤的生长（P=0.0009）。放疗后第3天给予Erb-(IL10)2能取得联合治疗最大协同作用。删除CD4+ T细胞或NK细胞仅轻微减轻联合治疗的协同作用，而删除CD8+T细胞则明显影响其治疗效果，导致肿瘤快速生长（P=0.0376）。通过检测肿瘤引流淋巴结中CD8+T细胞产生的SIY特异性IFN-γ的频率，我们发现与单一RT或Erb-(IL10)2治疗相比联合治疗能明显增强肿瘤抗原特异性T细胞反应。
　　结论：
　　我们的实验为放疗联合Erb-(IL10)2具有协同治疗过表达 EGFR肿瘤的潜能提供了主要证据。我们发现CD8+T细胞在联合治疗中至关重要。肿瘤抗原特异性T细胞反应被系统增强对远位肿瘤的清除至关重要。本研究为恶性黑色素瘤患者的联合试验提供了强有力的临床前证据。

目录

声明

引言

第一部分 放疗联合Erb-(IL10)2治疗恶性黑色素瘤时的剂量、给药时间选择及抗肿瘤效果评价

材料和方法

结果

讨论

结论

第二部分 放疗联合Erb-(IL10)2协同抗肿瘤作用的机制研究

材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

综述:放疗与抗EGFR抗体靶向免疫治疗联合应用的研究进展

缩略词表

致谢