蜂胶左金丸对幽门螺杆菌体外抑菌实验的研究

摘要

目的：(1)简化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori,Hp)培养操作,优选Hp培养与保存条件。(2)评价蜂胶、黄连及吴茱萸对Hp的体外联合抗菌效应. (3)应用中药血清药理学方法进行含蜂胶左金丸血清抗Hp的体外抑菌实验。 方法：(1)自创微需氧罐,正交设计优选Hp培养条件,并对-20℃保存的不同浓度两种保存液Hp复苏对照观察。(2)采用棋盘法设计,琼脂倍比稀释法测定不同浓度组合的蜂胶、黄连及吴茱萸对Hp最低抑菌浓度,并计算FIC指数判定联合效应。(3)不同剂量蜂胶左金丸经灌胃给药后,分离大鼠血清,采用打孔琼脂扩散法,对四种不同处理(新鲜未灭活、新鲜灭活、冰冻未灭活、冰冻灭活)后含药大鼠血清进行体外抑菌试验,测定抑菌环。 结果：(1)自创微需氧罐成功培养出Hp；哥伦比亚琼脂和脑心浸液琼脂中分别添加5.3﹪浓度小牛/绵羊血清和2.6﹪浓度混合抗生素,PH值7.5时,Hp生长良好；-20℃条件下：30﹪甘油/布氏肉汤和20﹪甘油/脑心浸液菌种保存时间分别为7天和20天.(2)黄连与吴茱萸联合应用对Hp呈相加作用；蜂胶与黄连、吴茱萸联合应用对Hp均呈协同作用。(3)不同剂量含蜂胶左金丸血清和含生理盐水血清对Hp均有明显抑制作用,且呈一定的量效关系；新鲜未灭活含药血清抑制Hp作用较新鲜灭活血清强；冰冻未灭活血清抗菌作用降低,冰冻灭活血清失去抗菌能力。 结论：(1)自创微需氧罐操作简便、效果可靠；哥伦比亚琼脂或脑心浸液琼脂+小牛血清+混合抗生素最适合Hp生长,混合抗生素能有效控制杂菌污染,对细菌生长无影响；-20℃条件下减少甘油含量,增加培养基浓度,能延长菌种保存时间。(2)三种药物联合应用后,MIC显著降低,体外抗Hp作用显著增强.抗菌效应以协同及相加作用为主,无无关作用及拮抗作用。(3)中药血清药理学方法可反映中药真实血药浓度的体外抗菌效果；发现大鼠血清中含有对Hp抑制或杀灭作用的活性物质；-20℃冰冻保存3周后未灭活含药血清仍具有抗菌能力；在含药血清体外抑菌实验中,以使用新鲜未灭活血清为宜。

目录

文摘

英文文摘

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引 言

第一部分自创微需氧罐正交设计优选幽门螺杆菌培养与保存条件

材料与方法

结 果

讨 论

第二部分蜂胶左金丸抑制幽门螺杆菌的体外实验

材料与方法

结果

讨 论

第三部分含蜂胶左金丸血清体外抗幽门螺杆菌作用

材料与方法

结 果

讨论

结论

参考文献

综 述 蜂胶左金丸抗幽门螺旋杆菌的研究进展