供者特异性脾细胞输注诱导外周耐受小鼠不同组织细胞内NF-κB p65的活性变化

摘要

目的：转录因子NF-κB是一种广泛存在于真核细胞内，能将信息从胞质传至胞核引起相应基因表达的重要转录因子。关于NF-κBp65在调节外周耐受方面的作用尚未见报道。本课题利用供者特异性脾细胞输注(donorspecificspleencelltransfusion，DST)诱导外周耐受后，观察小鼠不同组织细胞内NF-κBp65活性的变化，以探讨其在外周耐受发生过程中的活性改变及其意义。 方法：实验以BALB/c小鼠为供者，输注1×108个供者脾细胞3天和7天的C3H小鼠为受者，建立皮肤移植模型，每天观察移植物的生长情况并于术后第7天取移植皮片和脾脏，通过对移植物的存活时间、移植皮片的组织病理学检查和抗原特异性淋巴细胞增殖试验(Alamarblue染色)来了解免疫功能的改变；并以免疫组化染色方法(SP染色)检测小鼠脾脏和皮肤移植物中NF-κBp65活性的变化。 结果：输注后第7天手术组、输注后第3天手术组和对照组皮肤移植物的存活时间(MST)分别为(15.67±1.24)d、(11.33±1.25)d和(11.25±2.05)d(n=5)。与对照组相比较，输注后第7天手术组皮肤移植物MST明显延长(P＜0.05)；输注后第3天手术组则无显著性差异(P＞0.05)。将抗原特异性淋巴细胞经Alamarblue活细胞染色后，各组还原率为(14.9804±0.82473)％、(14.7864±0.79468)％和(21.0488±2.39681)％。与对照组相比较，输注后第3天手术组和输注后第7天手术组抗原特异性淋巴细胞的增殖反应均明显受抑制(P＜0.05)。对照组和输注后第3天手术组移植皮片的组织层次和血管结构均不清晰，并可见弥漫性的淋巴细胞浸润；输注后第7天手术组仅见少量的淋巴细胞浸润，且皮片的组织层次和血管结构均完整无明显坏死。各组皮肤移植物NF-κBp65表达阳性细胞百分数分别为(62.356±16.626)％、(25.452±18.650)％和(26.343±23.980)％；各组脾脏细胞NF-κBp65表达阳性率分别为(5.37±0.523)％、(8.815±1.775)％和(11.08±1.0173)％。与对照组相比较，输注后第3天手术组受体移植皮片及周围组织中NF-κBp65的活性无显著性差异(P＞0.05)；输注后第7天手术组受体移植皮片及周围组织中NF-κBp65的活性增加(P＜0.05)。与对照组相比较，输注后第3天手术组受体脾脏中NF-κBp65的活性无显著性差异(P＞0.05)；输注后第7天手术组受体脾脏中NF-κBp65的活性降低(P＜0.05)。 结论：移植前7d经尾静脉输注供者特异性脾细胞可诱导外周免疫耐受。外周耐受的产生可能与不同部位的免疫细胞内NF-κBp65活性改变有关。

目录

Ⅰ.前言

Ⅱ.材料和方法

Ⅲ.结果

Ⅳ.讨论

Ⅴ.参考文献

附录一综述 免疫调节分子NF-кB的结构与功能概述

附录二全文缩略语表

附录三在校期间发表论文一览表

附录四申明

致谢