串珠素反义cDNA对喉癌抑制作用的实验研究

摘要

第一部分 Perlecan、bFGF和VEGF在喉癌细胞Hep-2及喉鳞癌中的表达 实验一Perlecan、bFGF和VEGF在喉癌细胞Hep-2中的表达 目的：研究串珠素(HSPG2/perlecan)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)及高亲和力受体(FGFR)、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)及其高亲和力受体在喉癌细胞Hep-2中的表达，探讨它们与喉癌的生长、浸润及转移的关系。 方法：培养喉癌细胞Hep-2和正常永生化表皮细胞(HaCaT)，提取细胞总RNA，应用RT-PCR方法检测perlecanmRNA、bFGF及4个高亲和力受体(FGFR)mRNA、VEGF及2个高亲和力受体(Flt-1、KDR)mRNA在喉癌细胞Hep-2和HaCaT细胞中的表达；应用免疫细胞化学染色检测perlecan、bFGF、VEGF在Hep-2细胞和HaCaT细胞中的表达。 结论：Perlecan、bFGF和VEGF在喉癌细胞Hep-2的发生发展中起重要的作用。 实验二Perlecan、bFGF和VEGF在喉鳞癌中的表达 目的：研究串珠素(HSPG2/perlecan)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)及高亲和力受体(FGFR)、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)及其高亲和力受体在喉鳞癌中的表达，探讨它们与喉鳞癌的生长、浸润及转移的关系。 方法：应用RT-PCR方法检测62例喉鳞癌、54例癌旁组织和9例正常喉黏膜组织中的perlecanmRNA、bFGF及4个高亲和力受体(FGFR)mRNA、VEGF及2个高亲和力受体(Flt-1、KDR)mRNA的表达。 结论：Perlecan、bFGF和VEGF与喉鳞癌的发生发展有密切关系。 第二部分 串珠素反义cDNA对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响 目的：研究串珠素(HSPG2/perlecan)反义cDNA质粒转染对喉癌细胞Hep-2增殖及细胞侵袭能力的影响。 方法：利用阳离子脂质体作为载体，把重组真核表达载体perlecan反义cDNA质粒pAP转染喉癌细胞Hep-2，通过RT-PCR、Westernblot、MTT法及Transwell法检测转染后Hep-2细胞perlecanmRNA、蛋白质表达、细胞增殖水平及细胞侵袭能力，并观察转染后Hep-2细胞对碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的反应性。 结论：串珠素反义cDNA质粒转染可以有效地抑制喉癌细胞Hep-2的增殖及侵袭能力。 第三部分 串珠素反义cDNA对人喉癌裸鼠移植瘤的抑制作用 目的：研究串珠素(HSPG2/perlecan)反义cDNA质粒对喉癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤的影响。 方法：应用perlecan反义cDNA质粒转染的喉癌Hep-2细胞，建立人喉癌裸鼠移植瘤模型，观察裸鼠移植瘤的生长速度。通过RT-PCR和免疫组织化学方法检测裸鼠移植瘤的perlecanmRNA和蛋白质表达情况。 结论：串珠素反义eDNA质粒对喉癌Hep-2细胞裸鼠移植瘤的发生发展有重要影响。

目录

前言

第一部分Perlecan、bFGF和VEGF在喉癌细胞Hep-2及喉鳞癌中表达

第二部分串珠素反义cDNA对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响

第三部分串珠素反义cDNA对人喉癌裸鼠移植瘤的抑制作用

总结

综述 串珠素的生物学功能及其在肿瘤发生发展中的研究进展

附录一 近期以第一作者发表的文章

附录二 缩略词表

致谢