腺病毒介导肝细胞生长因子基因治疗缺血性心脏病作用机制的研究

摘要

冠心病是一种常见的心脏疾病，冠心病病人由于心脏冠状动脉器质性病变和或功能性改变，导致心肌血供不足，从而产生一系列临床症状和心脏结构及功能的改变。研究已证实，病变冠状动脉的病理变化主要包括冠状动脉壁出现脂质条纹、纤维斑块与复合病变三种情况。上述三种情况的基础主要包括管壁细胞的种类、数目、结构与功能发生改变，尤其是血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的变化。目前，有关冠心病的发病机制主要有脂浸润学说、损伤反应学说和单克隆学说、血栓形成和血小板聚集学说等。根据这些发病理论，目前临床上所用的治疗方法主要在于努力增加冠脉的供血从而减少心肌缺血的问题。目前临床上所使用的治疗方法虽然在一定时间内显著改善了缺血心肌的血供并提高了患者的生存时间与生存率，但尚不能改变冠脉病变的根本原因。 近年来，随着分子生物学研究的迅速发展，特别是人类基因组项目的成功实施，使我们能够从分子到蛋白水平探讨冠状动脉粥样硬化发病的原因以及相关的治疗方法。目前已知，肝细胞生长因子(Hepatocytegrowthfactor,HGF)是一种多功能的细胞生长因子，分子量为103KD，其前体是由728个氨基酸残基组成的单链，经蛋白酶水解后可产生有生物活性的异二聚体，其作用受体为细胞膜上的C-MET受体。种属分析表明，人和大鼠的HGF具有高度的同源性。晚近的研究表明，HGF对缺血心肌细胞具有保护作用，然而其保护作用的机制并不十分清楚。为了探讨肝细胞生长因子治疗缺血性心脏病的作用机制，我们进行了本项实验研究工作，共分为三部分。 第一部分肝细胞生长因子基因重组腺病毒载体的构建 目的利用AD-EASYTM系统，构建高效而又安全的肝细胞生长因子(HGF)基因腺病毒载体，以研究HGF基因在心脏内的表达，并建立心肌缺血模型，观察该基因载体对心肌缺血的治疗作用。 结论Ad-HGF和HGF具有其相同生物学效应，由于HGF合成昂贵，Ad-HGF合成成本低，效率高，为大量制备该载体提供依据. 第二部分Ad-HGF在兔急性心肌缺血时对心肌细胞凋亡的影响及对新生血管的作用 目的研究心肌发生急性缺血时，直接转染Ad-HGF后心肌缺血的变化情况。 结论Ad-HGF能够促进梗死区域血管的生长，减少细胞凋亡的发生，减少心肌梗死面积。 第三部分Ad-HGF对兔急性心肌梗死后心功能及心室重构的影响 目的观察Ad-HGF对心肌梗死后心功能及左室重构的影响。 结论Ad-HGF能减少心肌梗死范围、并能限制AMI后的左室重构，改善心功能。其作用机制可能与其抗心肌细胞凋亡有关。

目录

前言

第一部分肝细胞生长因子基因重组腺病毒载体的构建

第二部分Ad-HGF在急性心肌缺血时对心肌细胞凋亡的影响 及对新生血管的作用

第三部分Ad-HGF对心肌缺血后心功能及左室重构的影响

全文总结

参考文献

综述 基因介入治疗缺血性心脏病

附录 攻读博士学位期间的主要学术论文

致谢