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【6h】

转ie2基因荷胶质瘤小鼠的建立及该基因对肿瘤自身状态影响的研究

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目录

第一章 引言

第二章 实验材料

2.1 鼠胶质瘤细胞

2.2 实验动物

2.3 主要实验仪器设备

2.4实验中主要试剂来源

2.5主要实验试剂配制方法

2.5.1浓度为0.01M PBS溶液的配制

2.5.2 含有双抗的细胞培养液的配制

2.5.3 5хTBE缓冲液的配制

2.5.4 Western blot所需的溶液的配制

第三章 实验方法

3.1 细胞复苏、培养及冻存

3.1.1 G422和GL261细胞的复苏

3.1.2 G422和GL261细胞的换液

3.1.3 G422和GL261细胞的传代

3.1.4 G422和GL261细胞的冻存

3.2 转ie2基因鼠的PCR鉴定

3.2.1 鼠尾DNA的提取方法

3.2.2 鼠尾DNA的鉴定

3.3 对实验鼠进行荷瘤

3.4 RNA的提取

3.5 逆转录

3.6 半定量RT-PCR检测组织中ATF5 mRNA的表达情况

3.7 qPCR法分析组织中ATF5的表达水平

3.8 Western-blot检测组织中ATF5、IE86蛋白的表达情况

3.8.1 组织的蛋白提取方法

3.8.2 SDS?PAGE电泳

3.8.3 电转

3.8.4 免疫检测

3.8.5 化学发光检测

3.9 HE染色法观察肿瘤组织石蜡切片

3.9.1石蜡切片

3.9.2 HE染色

3.10 统计学方法

第四章 实验结果

4.1 GL261和G422细胞培养的差异

4.2 转ie2基因鼠的PCR法鉴定

4.3 荷瘤后实验鼠的形态及重量变化

4.4 肿瘤离体后的形态及重量变化

4.5 转ie2基因荷瘤鼠与野生鼠生存率的比较

4.6 HE染色法观察肿瘤组织细胞形态差异

4.7 肿瘤组织及脑部组织中ATF5的半定量检测情况

4.8肿瘤组织及脑部组织中ATF5的定量检测情况

4.9 肿瘤组织及脑部组织中ATF5与IE86的蛋白水平检测情况

第五章 讨论

第六章 结论与展望

参考文献

综述

一、人巨细胞病毒(HCMV)概述

二、 HCMV编码的主要基因和蛋白及其功能

三、转录激活因子5(ATF5)概述

四、胶质瘤(Glioma)与HCMV

五、转HCMV ie2基因小鼠

综述参考文献

攻读学位期间的研究成果

致谢

声明

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著录项

  • 作者

    于淼;

  • 作者单位

    青岛大学;

  • 授予单位 青岛大学;
  • 学科 微生物学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 钱冬萌;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 J0-;
  • 关键词

    基因对; 胶质瘤; 小鼠; 肿瘤; 自身状态;

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