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【6h】

成骨细胞填充壳聚糖明胶微球支架在颅骨修补中的应用研究

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目录

引言

实验材料与方法

1.1 骨髓间充质干细胞的提取、培养及诱导分化

1.1.1 实验对象

1.1.2 实验试剂

1.1.3 实验仪器

1.1.4 骨髓间充质干细胞提取及培养步骤

1.2 壳聚糖明胶微球支架的制备

1.2.1 实验试剂

1.2.2 实验仪器

1.2.3 实验步骤

1.3 壳聚糖明胶微球支架浸提液的制备

1.3.1 实验试剂

1.3.2 实验仪器

1.3.3 微球支架浸提液的制备

1.4 种植细胞前壳聚糖明胶微球支架的处理措施

1.4.1 实验试剂

1.4.2 实验仪器

1.4.3 实验步骤

1.5 壳聚糖明胶微球支架接种成骨细胞

1.5.1 实验试剂

1.5.2 实验仪器

1.5.3 实验步骤

1.6 显微镜下观察壳聚糖明胶微球结构

1.6.1 实验仪器

1.6.2 操作步骤

1.7 显微镜下观察成骨细胞形态

1.7.1实验试剂

1.7.2 实验仪器

1.7.3 操作步骤

1.8 MTT法检测壳聚糖明胶微球支架的细胞毒性

1.8.1 实验试剂

1.8.2 实验仪器

1.8.3 操作步骤

1.9 溶血试验检测壳聚糖明胶微球支架溶血反应

1.9.1 实验动物

1.9.2 实验试剂

1.9.3 实验仪器

1.9.4 操作步骤

1.10 死/活细胞染色

1.10.1 实验试剂

1.10.2 实验仪器

1.10.3 操作步骤

1.11 DAPI染色

1.11.1 实验试剂

1.11.2 实验仪器

1.11.3 操作步骤

1.12 RT-PCR 检测成骨细胞标志物COL1表达水平

1.12.1 实验试剂

1.12.2 实验仪器

1.12.3 操作步骤

1.13 统计学处理

实验结果

2.1 骨髓间充质干细胞提取、培养及诱导结果

2.2 显微镜下观察壳聚糖明胶微球的大致结构

2.3 显微镜下观察成骨细胞形态

2.4 支架细胞毒性检测结果

2.5 支架溶血试验结果

2.6 死/活细胞染色

2.7 壳聚糖明胶微球支架对成骨细胞粘附、增殖作用的DAPI染色结果

2.8 实时定量PCR检测壳聚糖明胶微球支架对成骨细胞标志物表达影响的结果

讨论

结论

参考文献

综述:骨组织工程研究进展概述

综述参考文献

攻读学位期间的研究成果

缩略词表(附录)

致谢

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