引言
实验材料与方法
1 细胞实验
1.1实验细胞来源
1.2实验试剂
1.3相关工作液配制
1.4主要仪器
1.5 细胞培养步骤方法
1.6 BV2小胶质细胞计数
2 慢病毒感染细胞预实验
2.1 实验试剂
2.2相关工作液配制
2.3 主要仪器
2.4 预感染实验
3 敲除P2X4R基因的慢病毒筛选
3.1 实验试剂
3.2抗体
3.3 主要仪器
3.4 感染筛选
4正式感染细胞实验
4.1实验细胞的分组
4.2分组细胞的处理
5 Real time PCR检测NLRP3、TNF-α的mRNA表达水平
5.1 实验试剂
5.2 实验仪器
5.3 RNA的提取
5.4 逆转录反应体系
5.5用 SYBR Green 染料法进行荧光实时定量检测
6 Western blots免疫印迹分析NLRP3、TNF-α蛋白表达水平
6.4 溶液配制
6.5 蛋白提取和定量检测
6.6 十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
7 统计学处理
实验结果
1 慢病毒预感染实验结果
2 敲除P2X4R基因的慢病毒筛选实验结果
3 各组细胞NLRP3和TNF-αmRNA的相对表达比较
4 各组细胞NLRP3、TNF-α蛋白相对表达量比较
讨论
结论
参考文献
综述:P2X受体介导的神经炎症：神经退行性病变中的关键作用
综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢
声明
