1前言
2 材料和方法
2.1材料
2.1.1细胞系
2.1.2受试物和试剂
2.1.3仪器设备及耗材
2.1.4主要试剂配制
2.2实验方法
2.2.1体外细胞培养与扩增
2.2.2 DNMT活性测定
2.2.3药物处理
2.2.4藻红蛋白(PE)荧光标记CD133抗体流式细胞术分析
2.2.5蛋白质印迹分析
2.2.6球形成试验
2.2.7创口愈合试验
2.2.8 Transwell细胞侵袭试验
2.2.9 qRT-PCR
2.3 统计学分析
3 结果
3.1 LCSLCs的鉴定
3.1.1 SMMC-7721细胞与球细胞自我更新能力的比较
3.1.2 SMMC-7721细胞与球细胞迁移能力的比较
3.1.3 SMMC-7721细胞与球细胞侵袭能力的比较
3.1.4 SMMC-7721细胞和球细胞CD133+细胞百分率测定
3.1.5 SMMC-7721细胞与球细胞干细胞表面和功能标志物mRNA表达的比较
3.1.6 SMMC-7721细胞与球细胞多能性维持因子 mRNA表达的比较
3.1.7 SMMC-7721细胞与球细胞DNMT1活性的比较
3.1.8 SMMC-7721细胞与球细胞DNMT1蛋白表达水平的比较
3.1.9 SMMC-7721细胞与球细胞DNMT1mRNA表达水平的比较
3.2 ChR和BrMC抑制SMMC-7721源性LCSLCs干性
3.2.1BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞自我更新能力的影响
3.2.2 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞迁移能力的影响
3.2.3 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞侵袭能力的影响
3.2.4 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞干细胞表面和功能标志物mRNA表达水平的影响
3.2.5 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞多能性维持因子mRNA表达水平的影响
3.2.6 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1活性的影响
3.2.8 BrMC对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1mRNA表达水平的影响
3.3 Aza-dC抑制SMMC-7721源性LCSLCs干性
3.3.1 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞自我更新能力的影响
3.3.2 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞迁移能力的影响
3.3.3 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞侵袭能力的影响
3.3.4 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞干细胞表面和功能标志物mRNA表达水平的影响
3.3.5 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞多能性维持因子mRNA表达水平的影响
3.3.6 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1活性的影响
3.3.7 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1蛋白表达水平的影响
3.3.8 Aza-dC对SMMC-7721细胞系球细DNMT1mRNA表达水平的影响
3.4 BrMC联合Aza-dC协作抑制LCSLCs干性
3.4.1 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞自我更新能力的影响
3.4.2 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞迁移能力的影响
3.4.3 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞侵袭能力的影响
3.4.4 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞干细胞表面和功能标志物mRNA表达水平的影响
3.4.5 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞多能性维持因子mRNA表达水平的影响
3.4.6 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1活性的影响
3.4.7 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1蛋白表达水平的影响
3.4.8 BrMC与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球DNMT1mRNA表达水平的影响
3.5 ChR联合Aza-dC协作抑制SMMC-7721源性LCSLCs干性
3.5.1 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞自我更新能力的影响
3.5.2 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞迁移能力的影响
3.5.3 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞侵袭能力的影响
3.5.4 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞干细胞表面和功能标志物mRNA表达水平的影响
3.5.5 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞多能性维持因子mRNA表达水平的影响
3.5.6 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1活性的影响
3.5.7 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球细胞DNMT1蛋白表达水平的影响
3.5.8 ChR与Aza-dC合用对SMMC-7721细胞系球 DNMT1mRNA表达水平的影响
4 讨论
5 结论
参考文献
附录1：英文缩略词索引
附录2：综述:DNA甲基转移酶与肿瘤的研究进展
参考文献
攻读硕士学位期间的主要成果
致谢
声明
湖南师范大学;
