声明
英文缩略词表
1.前言
2.材料和方法
2.1主要试剂和来源
2.2 主要药品和试剂配制
（1）LPS (1.0 mg/mL)
（2）RSG(0.1 mM/mL)
（3）RSG (1.0 mg/mL)
（4）PDTC(100 μM/mL)
（5）GW9662 (0.01mM/mL)
（6）蛋白免疫印迹PBS的配置 （pH 7.3）
（7）免疫组化PBS的配置
（8）1.5mol/LTris-HCl（pH 8.8）
（9）1.0mol/L Tris-HCl（pH 6.8）
（10）10×上样缓冲液
（11）转膜缓冲液
2.3主要仪器
2.4 实验方案
2.4.1 LPS暴露对小鼠胎盘和人胎盘滋养细胞11β-HSD2表达的影响
2.4.2 PPARγ激动剂上调人胎盘滋养细胞11β-HSD2表达
2.4.3 LPS暴露对小鼠胎盘PPARγ及其靶基因的影响
2.4.4 LPS暴露对人胎盘滋养细胞PPARγ核转位的影响
2.4.5 LPS暴露对小鼠胎盘以及人胎盘滋养细胞NF-κB信号的影响
2.4.6 LPS以NF-κB依赖的方式抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
2.4.7 LPS增强人胎盘滋养细胞中NF-κB p65和PPARγ相互作用
2.4.8 LPS介导的胎盘11β-HSD2下调与胎儿生长受限的关联的病例对照研究
2.5 主要实验方法和技术
2.5.1胎盘mRNA提取与RT-PCR
2.5.2 胎盘总蛋白的提取与蛋白浓度的测定
2.5.3 胎盘核蛋白的提取与蛋白浓度的测定
2.5.4细胞胞浆蛋白和核蛋白的提取与蛋白浓度的测定
2.5.5蛋白免疫印迹 （Western blotting）
2.5.6 免疫组织化学检测（ Immunohistochemistry，IHC）
2.5.7 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）
2.5.8小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)
2.5.9 细胞免疫荧光 (Immunofluorescence, IF)
2.6统计分析
3.结果
3.1 LPS暴露下调小鼠胎盘以及人胎盘滋养细胞11β-HSD2表达
3.1.1 LPS暴露下调小鼠胎盘11β-HSD2表达
3.1.2 LPS暴露下调人胎盘滋养细胞11β-HSD2表达
3.2 PPARγ激动剂上调人胎盘滋养细胞11β-HSD2表达
3.2.1 RSG激活人胎盘滋养细胞PPARγ 并上调11β-HSD2表达
3.2.2 PPARγ抑制剂对抗RSG上调人胎盘滋养细胞11β-HSD2
3.3 LPS暴露抑制小鼠胎盘PPARγ及其靶基因的表达
3.3.1孕期LPS暴露抑制小鼠胎盘PPARγ核转位及其靶基因
3.3.2孕期 LPS暴露抑制RSG激活小鼠胎盘PPARγ核转位
3.4 LPS暴露抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
3.4.1 LPS暴露抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
3.4.2 LPS暴露抑制RSG诱导人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
3.5 LPS暴露激活小鼠胎盘和人胎盘滋养细胞NF-κB信号
3.5.1 孕期LPS暴露激活小鼠胎盘NF-κB信号
3.5.2 LPS暴露激活人胎盘滋养细胞NF-κB信号
3.6LPS暴露通过NF-κB p65抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
3.6.1阻断NF-κB p65减轻LPS抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位
3.6.2沉默NF-κB p65减弱LPS抑制人胎盘滋养细胞PPARγ核转位和11β-HSD2表达
3.7人胎盘滋养细胞NF-κB p65和PPARγ之间的相互作用
3.7.1人胎盘滋养细胞NF-κB p65和PPARγ在胞浆之间的相互作用
3.7.2人胎盘滋养细胞NF-κB p65和PPARγ在胞核之间的相互作用
3.7.3人胎盘滋养细胞NF-κB p65和PPARγ之间的共定位
3.8AGA和SGA胎盘上11β-HSD2,PPARγ以及NF-κB p65的水平
3.9新生儿体重与胎盘11β-HSD2, PPARγ以及NF-κB p65水平之间的相关性
4.讨论
5.结论
6.研究不足和下一步研究计划
参考文献
附录
致谢
综述:胎盘糖皮质激素屏障(11β-HSD2)在生命中的作用
