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罗哌卡因破坏细胞自噬、抑制肿瘤生长并缓解机械性疼痛

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中英文缩略词表

1 前言

2 材料与方法

2.1 实验细胞和动物

2.2实验仪器

2.3实验试剂

2.4试剂配制

2.5实验方法

2.5.1 体外实验分组及处理(一)

2.5.2 体内实验分组及处理(二)

2.6 组织提取及保存

2.7 免疫印迹实验

2.7.1 细胞蛋白提取

2.7.2 蛋白浓度测定(Braford 法)

2.7.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)

2.7.4 上样

2.7.5 转膜

2.7.6 染色,封闭

2.7.7 免疫杂交

2.7.8 显影与定影

2.7.9 图像分析

2.8 免疫荧光

2.9 Hoechst 33342/PI双染

2.10 TUNEL染色

2.11 MTT检测

2.12 机械痛检测

2.13 统计分析

3 结果

3.1罗哌卡因引发自噬体形成

3.2 罗哌卡因破坏自噬性溶酶体再生

3.3罗哌卡因破坏自噬性降解

3.4 罗哌卡因在饥饿条件下破坏自噬性降解

3.5 罗哌卡因联合营养剥夺促进细胞死亡

3.6 罗哌卡因和CR的协同治疗抑制肿瘤生长

3.7 罗哌卡因可缓解肿瘤引起的机械性疼痛

4 讨论

5 结论

参考文献

附录

致谢

综述:癌症与自噬

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