我国部分地区奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌溶血性和荚膜多糖血清学分型及其免疫原性的研究

摘要

奶牛乳腺炎是造成奶牛业损失的主要疾病之一，金黄色葡萄球菌是导致奶牛乳腺炎的主要病原菌。从患乳腺炎的奶牛分泌的乳汁中分离出的金黄色葡萄球菌的胞壁大部分带有荚膜。金黄色葡萄球菌侵入乳腺组织后，由于其细胞壁表面的荚膜多糖能保护细菌免遭吞噬和杀伤，使金黄色葡萄球菌很难被根除。因此研制能够直接针对荚膜多糖的疫苗是预防金黄色葡萄球菌的途径之一。金黄色葡萄球菌的荚膜多糖共有11种血清型，其中5和8型为优势血清型。不同地区和时期引起奶牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌的血清型分布不同。为了辨别金黄色葡萄球菌的传染源、传播途径以及切断细菌的传播，需要对金黄色葡萄球菌进行准确的荚膜多糖血清学分型以确定病原菌与疾病之间的关系，这就需要有高鉴别力的金黄色葡萄球菌分型方法。由于荚膜多糖为小分子，是不完全抗原，不能刺激机体产生免疫应答和免疫记忆反应，因此不能作为独立的抗原使用。利用化学方法将载体蛋白与荚膜多糖偶联，偶联后的大分子物质可以刺激机体产生针对荚膜多糖的特异性抗体。本研究利用荚膜多糖与蛋白偶联作为抗原制备分型血清。
　　 金黄色葡萄球菌可产生多种毒素，α和β溶血素是常见的两种。其类毒素产生的抗体对金黄色葡萄球菌所致的绵羊和山羊乳腺炎有部分保护作用。
　　 为查明我国奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌主要流行血清型和溶血素情况，采用玻片凝集法对不同地区奶牛乳腺炎乳样中分离的376株金黄色葡萄球菌进行血清分型，对产生CP5或CP8的菌株再进行溶血素情况调查。结果表明，荚膜多糖5型占35.2％(132/376)，8型占27.9％(139/376)，未分型菌株占36.9％(139/376)。产CP5或CP8的237株菌株中，54株菌仅产生α溶血素，占鉴定菌株的22.78％(54/237);100株菌株仅产生β溶血素，占鉴定菌株的42.19％(100/237);83株产生α和β溶血素，占鉴定菌株的35.02％(83/237)。将荚膜多糖偶联至载体蛋白上，可以显著提高其免疫原性。该研究结果为控制奶牛金黄色葡萄球菌乳腺炎提供了基础数据。

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摘要

第一部分 文献综述

第一章 奶牛乳腺炎的研究进展

1．奶牛乳腺炎的危害

2．奶牛乳腺炎的发病原因

3．奶牛乳腺炎的发病机理

4．奶牛乳腺的防御机制

5．奶牛乳腺炎的防治

第二章 金黄色葡萄球菌荚膜多糖研究进展

1．金黄色葡萄球菌荚膜多糖的血清型

2．5型和8型金黄色葡萄球菌

3．金黄色葡萄球菌荚膜多糖的分子结构组成

4．金黄色葡萄球菌荚膜多糖的表达调控和致病机制

第三章 金黄色葡萄球菌溶血素研究进展

1．金黄色葡萄球菌溶血素

2．α溶血素概述

3．β溶血素概述

第四章 金黄色葡萄球菌疫苗的研究进展

第二部分 试验研究

第一章 金黄色葡萄球菌溶血类型调查

1．材料

2．试验方法

3．结果

第二章 金黄色葡萄球菌荚膜多糖的血清学分型

1．材料

2．试验方法

3．结果

第三章 不同金黄色葡萄球菌分离株荚膜多糖的产量

1．材料

2．试验方法

3．结果

4．本章小结

第四章 金黄色葡萄球菌荚膜多糖免疫原性研究

1．材料

2．试验方法

3．结果

4．本章小结

第三部分 综合讨论

1．荚膜多糖的免疫原性

2．荚膜多糖的提取与鉴定

3．偶联方法的选择

4．细菌血清学分型

5．细菌产α和β溶血素调查

结论

研究展望

参考文献

附录

致谢