内源激素ABA含量、抗氧化物酶活性和种子质量在丝瓜种子发育过程中的变化

摘要

种子的发育从双受精开始，经历胚胎发生，物质积累和成熟脱水最终发育成具有可独立萌发成苗的种子。然而，种子发育的研究多集中在模式植物上，对丝瓜种子的发育研究较少。本文选用两个杂交丝瓜品种种子（浙大2号和浙大3号）作为试验材料，在不同发育阶段采收种子，研究其内源激素脱落酸(ABA)含量，抗氧化物酶活性和种子质量在种子发育过程中的变化。取得以下结果。
　　 1.建立了适合分析丝瓜种子内源激素ABA含量的高效液相色谱法(HPLC)。该方法采用C18反相色谱柱，柱温35℃，以甲醇和水（含0.2％磷酸）(5∶5，V/V)为流动相，流速为0.8 ml/min，检测波长为260 nm。样品前处理经乙腈提取，氮吹浓缩，冷冻去脂和乙酸乙酯萃取后用于HPLC分析。结果表明ABA的检出限为0.01 mg/L，平均回收率为80.53％。利用上述优化方法测定不同发育时期丝瓜种子内源激素ABA的含量，进一步验证该方法快速、可靠，同时也为丝瓜种子中其他植物激素的测定提供了参考。
　　 2.研究了脱落酸含量和抗氧化物酶活性在种子干燥处理前后的变化。以人工干燥的不同成熟阶段的丝瓜种子和同时期新鲜刚收获的种子为试验材料，测定了脱落酸含量，抗氧化物酶活性和干燥后种子的发芽率。结果表明:丝瓜种子在物质积累时期开始获得脱水忍耐。ABA在物质积累时期含量较高，随着种子发育到种子成熟脱水阶段含量逐渐下降，仅仅ABA的含量变化并不能反映出种子成熟脱水过程ABA的调控。经过人工干燥后，多种抗氧化物酶活性明显增加。
　　 3.确定了丝瓜种子田间收获的最佳时间。利用标准发芽试验，抗冷测定，加速老化试验和电导率测定四种方法有效地检测了不同发育阶段的种子质量。结果表明:丝瓜种子的最佳收获时间为授粉后56-63天。浙大2号和浙大3号分别在授粉后49天和42天获得最大种子干重，而最佳的种子质量是在授粉后56天和49天获得。最佳的种子质量发生在种子获得最大干重之后。此外，种皮中的黑色素含量与种子的发芽能力有紧密的相关关系，可作为丝瓜种子收获的依据。

目录

声明

致谢

摘要

前言

1 文献综述

1．1 植物内源激素测定技术进展

1．1．1 植物激素的提取和纯化

1．1．2 植物激素的分析方法

1．1．3 植物激素检测技术在种子材料上的应用

1．2 正常种子在成熟脱水过程中细胞内生理生化的变化

1．2．1 抗氧化系统在种子成熟脱水过程中的变化

1．2．2 脱落酸含量的变化

1．2．3 双糖和寡糖的积累

1．2．4 细胞内玻璃态的形成

1．2．5 蛋白质的合成和积累

1．3 种子质量和耐脱水能力在种子发育过程中的变化

1．3．1 种子质量在种子发育过程中的变化

1．3．2 种子耐脱水能力在种子发育中的变化

2 高效液相色谱测定丝瓜种子内源ABA含量的研究

2．1 材料和方法

2．1．1 仪器与试剂

2．1．2 色谱条件

2．1．3 试验材料

2．1．4 内源激素的提取和纯化

2．1．5 标准品的制备

2．2 结果与讨论

2．2．1 色谱条件的选择

2．2．2 激素的提取和纯化

2．2．3 方法学考察

2．2．4 样品分析

2．3 结论

3 ABA和抗氧化物酶在丝瓜种子耐脱水能力获得过程中的作用

3．1 材料与方法

3．1．1 种子材料的种植

3．1．2 种子的获得和处理

3．1．3 种子水分含量和单粒种子干重测定

3．1．4 标准发芽实验

3．1．5 ABA含量测定

3．1．6 抗氧化物酶活性的测定

3．1．7 丙二醛含量的测定

3．1．8 统计分析

3．2 结果

3．2．1 种子含水量和干重的变化

3．2．2 种子耐脱水能力的变化

3．2．3 ABA含量的变化

3．2．4 过氧化氢酶活性的变化

3．2．5 谷胱甘肽还原酶活性的变化

3．2．6 超氧化物歧化酶活性的变化

3．2．7 抗坏血酸过氧化物酶活性的变化

3．2．8 愈创木酚过氧化物酶活性的变化

3．2．9 丙二醛含量在种子耐脱水能力获得过程中的变化

3．3 讨论

4 丝瓜种子质量在种子发育过程中的变化

4．1 材料与方法

4．1．1 丝瓜种植

4．1．2 丝瓜种子的获得和处理

4．1．3 种子质量测定

4．1．4 黑色素含量测定

4．1．5 统计分析

4．2 结果

4．2．1 发芽能力在种子发育过程中的变化

4．2．2 逆境对不同成熟阶段杂交丝瓜种子发芽能力的影响

4．2．3 种子发育期间种子浸出液电导率值的变化

4．2．4 黑色素含量在种子发育过程中的变化

4．2．5 黑色素含量与种子质量的关系

4．3 讨论

参考文献