糖皮质激素对阿霉素肾病大鼠上颌骨骨密度影响的研究

摘要

研究目的:
　　建立阿霉素肾病大鼠模型，观察激素干预对肾病大鼠上颌骨骨密度的影响，为经激素治疗的肾病患者口腔颌骨骨质变化提供理论依据。
　　实验材料和方法:
　　1.将60只SPF级6周龄Wistar雄性大鼠随机平均分成两组：正常组和模型组，每组30只,所有大鼠尿蛋白试纸检测为阴性。模型组采用间隔1周2次尾静脉注射盐酸阿霉素4mg/kg建立大鼠阿霉素肾病模型，正常组以同样方法注射生理盐水4mg/kg。注射完成4周末，检测24h尿蛋白总量，各组随机抽10只大鼠取右肾制作 HE切片。建模成功后，正常组分为空白对照（A）组，激素（B）组；模型组分为肾病（C）组，肾病+激素（D）组，B、D两组糖皮质激素（30mg/kg·d）， A、C两组等体积生理盐水干预，1次/日，共10周。
　　2.第16周末处死，检测血清钙（Ca2+）、磷（P3+）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酐（Scr）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、骨钙素（BGP）、I型原胶原N-端前肽（PINP）及β-I型胶原交联C末端肽（CTX）骨代谢水平。
　　3.将离体标本上颌骨包埋好放置于固定容器内，Micro-CT对标本进行360°扫描，使用Minics10.01软件分割出右上第一磨牙区牙根间牙槽骨并三维重建，获得三维图像。测量骨密度（BMD）、牙槽骨体积分数（BVF）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁间隙（Tb.Sp）、骨小梁数目（Tb.N）等参数，对检测结果进行统计分析。
　　4.离体标本脱钙、脱水包埋，切片进行HE染色。
　　实验结果:
　　1.大鼠阿霉素注射后，随时间延长，活动度减少，水食量下降，精神萎靡，毛发缺乏光泽、灰暗、松乱，个别大鼠出现尾巴脱皮、糜烂、结痂，24h尿液中尿蛋白含量＞100mg/24h。
　　2.肾脏切片观察，正常组：肾皮质、髓质构造清楚，小球毛细血管丛未见增生，肾小球饱满，肾小管构造清楚；模型组：可见系膜细胞轻度增生，基膜增厚，肾小球萎缩，肾小管内可见蛋白管型。
　　3.生化及骨代谢检测显示，除空白对照组外，血清钙（Ca2+）、磷（P3+）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）浓度升高，血清白蛋白（ALB）浓度下降（P＜0.05）。骨钙素（BGP）与 I型原胶原N-端前肽(PINP)在肾病＋激素组中表现出显著性下降（P＜0.01），激素组、肾病组与空白对照组对比均有统计学意义（P＜0.05）。但激素组和肾病组分析中BGP变化无差异(P＞0.05)，PINP在该两组中有差异性（P＜0.05）。同时β-I型胶原交联C末端肽(CTX)在四组比较中肾病＋激素组具有显著性增高（P＜0.01）。
　　4.Micro-CT扫描显示：除空白对照组，其余组骨小梁显微结构指数表明，骨密度（BMD）、骨体积分数（BVF）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁间隙（Tb.Sp）均具有显著性差异（P<0.01）。肾病＋激素组根间骨质骨小梁变化最大，吸收最为明显。 Tb.Sp在肾病＋激素组及激素组均有增宽，BVF减低，Tb.Th变薄。肾病组骨质特征变化较轻。骨小梁数目（Tb.N）在各组骨质变化中无统计学差异（P＞0.05）。
　　5.组织病理学观察：激素组、肾病组、肾病＋激素组三组大鼠骨小梁呈现不同程度的稀疏、细小、间距变宽，排列无规则，肾病＋激素组改变最为明显，呈条索状。空白对照组大鼠骨小梁粗大致密，分布规则有序。
　　结论:
　　1.阿霉素能够快速成功的复制肾病大鼠模型，重复性好，可模拟临床肾病发生发展。
　　2.肾病组、肾病＋激素组检测提示肾病自身对其产生影响，激素治疗加重生化指标的变化，二者具有协同性，应定期对肾病患者进行血常规监测。
　　3.骨代谢特异性指标检测表明血清骨代谢指标能客观反映骨密度变化，是监测和诊断骨代谢疾病较为精确和灵敏的参考指标。
　　4.Micro-CT三维扫描提示肾病本身影响骨质吸收，并且激素干预后激素与肾病相互协同加重大鼠骨质破坏的程度。
　　5.组织病理观察显示与Micro-CT表现一致，提示激素干预对颌骨骨微结构产生破坏。

目录

声明

符号说明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、阿霉素肾病大鼠模型的建立

1.1实验对象

1.2研究方法

1.3结果

1.4讨论

1.5小结

二、 激素对阿霉素肾病大鼠上颌骨的影响

2.1 实验仪器及试剂

2.2实验方法

2.3实验结果

2.4讨论

2.5小结

结论

研究创新

不足与展望

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

综述:糖皮质激素治疗肾病综合征对口腔的影响

致谢

个人简历