早期宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中Ki-67、PCNA的表达及其与HPV感染相关性的研究

摘要

目的： 研究Ki-67抗原与增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)在早期宫颈癌及宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia，CIN)中的表达规律，并分析其与人乳头瘤病毒(Homan papillary virus，HPV)感染的关系，探究三者联合应用的早期诊断价值。 方法： 本研究应用免疫组织化学(Immunohistochemical assay，IHC)S-P法检测宫颈病变组织中Ki-67抗原及PCNA抗原的表达，并结合临床病理特点进行分析。应用HPV L1通用引物MY09/MY11行聚合酶链反应(Polymerase chain reaction，PCR)检测宫颈病变组织中HPV感染情况，并结合部分患者临床HCⅡ检测结果进行比较。研究组包含CIN标本37例，早期高分化宫颈鳞癌标本18例。37例CIN标本中包含CINI(LSIL)20例、CINⅡ/Ⅲ(HSIL)17例。18例早期宫颈癌标本中含IA～IB期8例，ⅡA期10例。对照组为手术切除的慢性宫颈炎标本15例。 结果： 1 Ki-67在宫颈组织中的表达与临床病理特征的关系研究组宫颈鳞癌组织、CIN组织与对照组慢性宫颈炎组织中均可检测到不同几率的Ki-67抗原阳性表达。免疫组织化学检测Ki-67抗原表达，阳性表现为增殖细胞核着棕黄色。研究组宫颈鳞癌组织中Ki-67阳性表达率为100﹪(18/18)，其中工期和Ⅱ期均为100﹪阳性表达。CIN组织中Ki-67阳性表达率为为89.19﹪(33/37)。其中CINI和CINⅡ/Ⅲ组织中的Ki-67阳性表达率分别为85．00﹪(17/20)、94．12﹪(16/17)。在对照组慢性宫颈炎组织中，Ki-67阳性表达率为33．33﹪(5/15)。早期宫颈癌组织与慢性宫颈炎组织之间、CIN组织与慢性宫颈炎组织之间Ki-67阳性表达率，应用卡方检验，统计学上具有显著差异(P<0.05)。检验Ki-67阳性表达率与宫颈各级病变严重程度的关系，在CINⅠ、CIN Ⅱ/Ⅲ和早期宫颈鳞癌工期ⅡA期之间，应用卡方检验，统计学上不具有显著差异(P>0.05)。 进一步比较Ki-67抗原在早期宫颈癌、CIN各级别与对照组慢性宫颈炎中的过表达率(＋＋～＋＋＋)，Ki-67抗原显示在CINⅠ组与慢性宫颈炎相比不具显著性差异(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌Ⅰ期/ⅡA期与慢性宫颈炎相比差异显著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ组和早期宫颈癌各组间不具显著性差异(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ组与CINⅠ组间差异显著(P<0.05)。 2 PCNA在宫颈组织中的表达与临床病理特征的关系研究组宫颈鳞癌组织、CIN组织与对照组慢性宫颈炎组织中均可检测到不同几率的PCNA抗原阳性表达。免疫组织化学检测PCNA抗原表达，阳性表现为增殖细胞核着棕黄色。研究组宫颈鳞癌组织中PCNA阳性表达率为100﹪(18/18)，其中Ⅰ期和Ⅱ期均为100﹪阳性表达。CIN组织中：PCNA阳性表达率为为97．30﹪(36/37)。其中CINⅠ和CINⅡ/Ⅲ组织中的PCNA阳性表达率分别为95．00﹪(19/20)、100.00﹪(17/17)。在对照组慢性宫颈炎组织中，PCNA阳性表达率为66．67﹪(10/15)。 早期宫颈癌组织与慢性宫颈炎组织之间、CIN组织与慢性宫颈炎组织之间PCNA阳性表达率，应用卡方检验，统计学上具有显著差异(P<0.05)。检验PCNA阳性表达率与宫颈各级病变严重程度的关系，在CINⅠ、CIN Ⅱ/Ⅲ和早期宫颈鳞癌Ⅰ期/ⅡA期之间，应用卡方检验，统计学上不具有显著差异(P>0.05)。 进一步比较PCNA抗原在早期宫颈癌、CIN各级别与对照组慢性宫颈炎中的过表达率(＋＋～＋＋＋)，PCNA抗原显示在CINⅠ组与慢性宫颈炎相比不具显著性差异(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌Ⅰ期/ⅡA期与慢性宫颈炎相比差异显著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ组和早期宫颈癌各组间不具显著性差异(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ组与CINⅠ组间差异显著(P<0.01)。 3宫颈病变组织中K-67及PCNA表达之间的相关性Spearman等级相关分析显示：Ki-67、PCNA的表达强度存在正相关关系，等级相关系数rs=0．6565。P<0.01。 4 HPV在早期宫颈癌和CIN中的感染与临床病理特征的联系研究组宫颈鳞癌组织、CIN组织与对照组慢性宫颈炎组织中均可检测到不同几率的人乳头瘤病毒感染。PCR检测HPV表达，研究组宫颈鳞癌组织中HPV阳性表达率为100﹪(18/18)，其中工期和Ⅱ期均为100﹪阳性表达。CIN组织中HPV阳性表达率为72.97﹪(20/37)。其中ClNI和CINⅡ/Ⅲ组织中的HPV阳性表达率分别为30.00﹪(6/20)、82.35﹪(14/17)。在对照组慢性宫颈炎组织中，HPV阳性表达率为13.33﹪(2/15)。 早期宫颈癌组织与慢性宫颈炎组织之间、CIN组织与慢性宫颈炎组织之间HPV阳性表达率，应用卡方检验，统计学上具有显著差异(P<.05)。比较HPV在早期宫颈癌、CIN各级别与对照组慢性宫颈炎中的感染率，HPV感染率在CINI组与慢性宫颈炎相比不具显著性差异(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宫颈癌Ⅰ期/ⅡA期与慢性宫颈炎相比差异显著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ组和早期宫颈癌各组间不具显著性差异(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ组与CINI组间差异显著(P<0.01)。 结合其中33例患者(含浸润癌工期5例，CINⅡ/Ⅲ 12例，CINI10例，慢性宫颈炎6例)临床HCⅡ检测结果进行比较分析，除2例PCR HPV-DNA阳性的CINI及1例早期浸润癌的HCⅡ检查结果提示阴性外，其余HCⅡ结果与本研究相符。 5 Ki-67及PCNA表达与HPV感染之间的相关性Spearman等级相关分析显示，HPV感染与Ki-67的表达强度存在正相关关系，等级相关系数rs=0.6072，P<0.05。HPV感染与PCNA的表达强度存在正相关关系，等级相关系数rs=0.7835，P<0.05。 结论： Ki-67、PCNA抗原表达均反映了宫颈上皮增殖性病变的发生，其强阳性表达与宫颈高度鳞状上皮内病变(High grade squamous．intraepithelial lesion，HSIL)与早期宫颈癌显著相关。Ki-67、PCNA抗原的强阳性表达在HSIL与早期宫颈癌之间、低度鳞状上皮内病变(Low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)与慢性宫颈炎之间无显著差异，但在HSⅡ与LSIL之间表达差异显著。Ki-67、PCNA的表达强度存在正相关关系。HPV阳性表达提示宫颈癌前病变的潜在危险性，与HSIL与早期宫颈癌显著相关。HPV阳性率在HSIL与早期宫颈癌之间、LSIL与慢性宫颈炎之间无显著差异，但在HSIL与LSIL之间表达差异显著。Ki-67、PCNA的表达与HPV感染率在宫颈病变组织中存在相关性。联合检测宫颈鳞癌组织中Ki-67、PCNA的过表达率有助于判断细胞的增殖活性，可作为早期诊断宫颈浸润癌和HSIL的诊断标记物。其与宫颈HPV感染检测相结合，可发现高度病变倾向的存在，提高宫颈病变的早期正确诊断率。

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