葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠血管重构的保护作用

摘要

目的：
　　原发性高血压是最常见的心血管疾病之一，也是引起心脑血管等多种疾病的主要危险因素，严重影响心、脑、肾、动脉等多个重要靶器官的结构与功能，最终导致靶器官结构改变和功能衰竭，严重影响人类的生命健康。因此保护高血压患者靶器官的结构与功能是目前高血压治疗的重中之重。研究证实血管重构(arterial remodeling)与高血压引起的靶器官损害密切相关。高血压血管重构的发生机理相当复杂，其确切发生机理尚不明确。越来越多的证据表明，氧化应激在高血压血管重构的病理生理过程中发挥着极为重要的作用。葡萄籽原花青素是存在于葡萄籽中的一类多酚类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗过敏、抗癌、抗突变、抗衰老等多种生物学活性，研究证实葡萄籽原花青素(GSPE)对氧化应激所致的心血管疾病显示出良好的保护作用。由此我们推测GSPE可能能够通过改善自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)主动脉组织氧化应激水平而延缓高血压的血管重构。本研究主要探讨GSPE在自发性高血压大鼠血管重构的作用。
　　方法：
　　选择20周龄的雄性自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar-Kyoto(WKY)大鼠，分别为20只和10只，随机分为3组（每组10只）:(1)对照组(WKY-C组):WKY大鼠每日给予0.9％生理盐水1 ml灌胃;(2)模型组(SHR-C组):SHR大鼠每日给予0.9％生理盐水1 ml灌胃;(3)GSPE组（SHR-T组）:SHR大鼠给予葡萄籽原花青素(250mg· kg-1·d)1ml灌胃。22周实验过后，观察大鼠体重、血压、脉搏波速度(PWV)情况，采用苏木素-伊红(HE)染色和维多利亚蓝-天狼星红染色观察大鼠主动脉形态学改变，应用电子显微镜观察主动脉的超微结构，检测一氧化氮(NO)、内皮素1（ET-1）观察血管内皮功能，检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化氢酶(CAT)观察氧化应激水平。
　　结果：
　　1.GSPE对自发性高血压大鼠体重、血压无明显影响。22周实验过程中，三组大鼠体重之间无明显差异(P＞0.05)。GSPE组与模型组大鼠的血压在实验过程中不断升高，较对照组明显增高(P＜0.01)，但GSPE组大鼠与模型组大鼠之间的血压差别无统计学意义(P＞0.05)。
　　2.GSPE降低自发性高血压大鼠的PWV。GSPE组和模型组大鼠PWV与对照组相比明显增加(P＜0.01)，而GSPE组PWV较模型组明显下降(P＜0.05)。
　　3.GSPE改善了自发性高血压大鼠的血管重构。与对照组比较，模型组大鼠主动脉管壁厚度增加(P＜0.01)，内径增加(P＜0.05)，壁厚内径百分比增加(P＜0.05)。经GSPE处理后，主动脉管壁变薄(P＜0.01)，壁厚内径百分比降低(P＜0.05)，而内径变化无统计学差异(P＞0.05)。HE及维多利亚蓝-天狼星红染色可见，与对照组相比，模型组血管胶原纤维明显增多，弹力纤维排列紊乱，分叉甚至断裂;经GSPE治疗后，血管胶原纤维明显减少，弹力纤维排列较整齐。
　　4.GSPE改善了自发性高血压大鼠主动脉的超微结构。与对照组相比，模型组大鼠主动脉内皮损伤不连续，断裂，脱落，可见成纤维样细胞迁移至内皮下，内皮下基底膜反复重塑呈虫蚀样改变，内弹力膜结构不完整，弹力膜内有大量胶原成分出现，与基底膜相互交叉。而GSPE改善了基底膜和内弹性膜的精细结构并减少了内皮下成纤维细胞样细胞的数目。
　　5.GSPE改善了自发性高血压大鼠血管内皮功能。与对照组相比，模型组大鼠主动脉组织中NO表达下降(P＜0.01)，ET-1表达增加(P＜0.01)。GSPE组较模型组大鼠主动脉组织中NO表达增加(P＜0.01)，而ET-1表达下降(P＜0.01)。
　　6.GSPE降低了自发性高血压大鼠主动脉组织中氧化应激水平。与对照组比较，模型组大鼠主动脉组织中SOD、CAT含量均下降(P＜0.01)，氧化应激产物MDA生成增加(P＜0.01)。与模型组相比，GSPE组氧化应激水平降低，表现在MDA生成减少(P＜0.05)，SOD、CAT含量均上升(P＜0.01)。
　　结论：
　　1.自发性高血压大鼠主动脉发生了血管重构。
　　2.自发性高血压大鼠主动脉血管重构伴随着体内氧化/抗氧化平衡紊乱及内皮功能障碍。
　　3.GSPE可以改善自发性高血压大鼠主动脉组织中氧化应激水平，延缓血管重构的过程。

目录

声明

摘要

符号说明

1．前言

2．材料与方法

2．1．实验动物

2．2 实验试剂和耗材

2．3 主要实验设备

2．4 实验方法

2．5 主动脉形态学的观察

2．6 主动脉组织相关指标测定

2．7 电镜观察

2．8 统计学方法

3．结果

3．1 GSPE对自发性高血压大鼠血压及体重的影响

3．2 GSPE对自发性高血压大鼠脉搏波速度的影响

3．3 GSPE对自发性高血压大鼠主动脉形态学的影响

3．4 GSPE对自发性高血压大鼠血管内皮功能的影响

3．5 GSPE对自发性高血压大鼠氧化应激水平的影响

3．6 GSPE对自发性高血压大鼠主动脉组织超微结构的影响

4．讨论

4．1 高血压概述

4．2 高血压与血管重构

4．3 血管内皮功能与血管重构

4．4 脉搏波速度与血管重构

4．5 氧化应激与血管重构

4．6 GSPE的生物学特性及相关性研究

5．结论

附图表

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间撰写及发表的论文