循环炎性标志物、微环境肿瘤相关巨噬细胞与TIMP3表达对胃癌新辅助化疗预后影响的研究

摘要

本文主要从以下几个部分展开论述：
　　第一部分 胃癌患者循环炎性标志物对新辅助化疗预后影响的研究
　　目的:①分析胃癌患者新辅助化疗前NLR、PLR与正常对照组的的差异;②分析新辅助化疗前后的NLR、PLR的变化，探讨新辅助化疗对他们的影响;③分析探讨新辅助化疗前后NLR、PLR与临床病理的关系;④单因素及多因素分析化疗前后NLR、PLR与OS的关系;⑤分析探讨胃癌新辅助化疗前NLR、PLR变化与预后的关系。
　　方法:回顾性分析2007年1月至2015年12月山东省肿瘤医院胃肠外科接受新辅助化疗的91例原发性胃癌患者及91例正常查体的患者，所有胃癌患者接受氟尿嘧啶为主的2周方案，化疗方案为:DOF多西紫杉醇(Docetaxel)50mg/m2，奥沙利铂(Cisplatin)85mg/m2，氟尿嘧啶(Fluorouracil)2400mg/(m2/d)持续持续泵入24小时，氟尿嘧啶(Fluorouracil)400mg/(m2/dl)静脉注射。DF多西紫杉醇(Docetaxel)85mg/m2+氟尿嘧啶(Fluorouracil)2400mg/(m2/d)持续持续泵入24小时+氟尿嘧啶(Fluorouracil)400mg/(m2/dl)。FOLFOX奥沙利铂(Oxaliplatin)85mg/(m2/dl)+氟尿嘧啶(Fluorouracil)400mg/m2+氟尿嘧啶(Fluorouracil)600mg/(m2/dl)。化疗周期数2-6周期。根据化疗方案的不同将所有患者分为三药联合组(DOF)，两药联合组(FOLFOX，DF)。收集健康志愿者外周静脉血以及胃癌入组患者新辅化疗前的7天之内的外周静脉血，以及化疗结束21天以后术前7天之内的外周静脉血，采用全自动外周血液分析仪检测采集标本中的中性粒细胞和血小板以及淋巴细胞的计数，计算中粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)及血小板与淋巴细胞比值(PLR)。NLR=外周血中性粒细胞计数与外周血淋巴细胞计数比值，化疗前后NLR、PLR最佳临界值均通过ROC曲线计算得出。胃癌新辅助化疗前、后分别行强化CT评估肿块大小，通过实体瘤的疗效评价标准(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors，RECIST)来进行临床疗效的判定。关于胃癌患者入院时的NLR、PLR与正常的对照组之间应独立样本t检验。新辅助化疗前后的NLR、PLR的变化采用配对t检验，新辅助化疗前后NLR、PLR与临床病理特征之间是的关系用卡方检验。生存分析采用Kaplan-Meier，多因素分析采用COX分析。
　　结果:1.胃癌患者NLR，PLR高于正常对照组(1.85±0.08vs1.62±0.06，p＜0.05)。胃癌新辅助化疗后NLR，PLR比化疗前均降低(NLR1.89±0.91vs1.35±0.99,p＜0.05;PLR127.81±63.46vs93.19±37.04;p＜0.05)。
　　2.91例胃癌患者化疗前NLR、PLR高低与临床病理参数之间均无统计学差异p＞0.05。
　　3.91例胃癌患者化疗后NLR低的患者更容易病理消退p＜0.05，化疗后PLR的的高低与病理消退无统计学差异p＞0.05。
　　4.单因素分析91例胃癌患者接受新辅助治疗后行根治性D2淋巴结切除后临床病理特征与OS之间的关系发现只有入院时PLR高低有统计学差异p=0.008。
　　5.多因素分析91例胃癌患者接受新辅助治疗后行根治性D2淋巴结切除后临床病理特征与OS之间的关系发现只有入院时PLR高低有统计学差异p=0.009，可以作为独立的预后因素。
　　6.胃癌新辅助化疗前后PLR变化与患者的生存呈负相关，化疗前后PLR均低预后较好，化疗前高化疗后低预后较好，化疗前低化疗后高预后较差，化疗前后均高预后最差。
　　结论:1.胃癌患者NLR、PLR均高于正常对照组，可以作为胃癌初步筛查的标志物之一，化疗药物可以降低新辅助化疗胃癌患者NLR，PLR，新辅助化疗胃癌患者中化疗后NLR低的患者更容易病理消退，相反的是化疗后PLR高低与病理消退无统计学差异。
　　2.胃癌新辅助化疗前后PLR变化与患者的生存呈负相关，提示化疗后的PLR变化有望成为胃癌新辅助化疗临床疗效判定的有效因子。
　　第二部分 微环境肿瘤相关巨噬细胞与TIMP3表达对胃癌新辅助化疗预后影响的分析
　　目的:本研究旨在评估新胃癌新辅助化疗后肿瘤组织巨噬细胞浸润和TIMP3表达及新辅助化疗胃癌组织中的微环境肿瘤相关巨噬细胞和TIMP3表达及临床病理参数及预后的关系，微环境肿瘤相关巨噬细胞和TIMP3表达在不同化疗方案中表达差异，并研究了两者在肿瘤组织中的相关性。
　　方法:应用免疫组织化学(IHC)检测75例原发性新辅助化疗胃癌(NACGC)标本中微环境TAMs和TIMP3表达。评价了TIMP3表达与微环境TAMs表达与临床病理特征及总体生存的关系。用斯皮尔曼等级相关用于分析TIMP3表达与TAMs表达的相关性进行了分析。
　　结果:1、45例患者接受DOF方案化疗，30例接受FOLFOX或DF方案化疗。两组患者中位生存时间为34月vs 27月; p=0.104;无统计学差异;50例患者术前未应用抗生素，25例患者术前应用抗生素。两组患者中位生存时间为29月vs 27月; p=0.789;无统计学差异。
　　2、TIMP3和微环境TAMs在DOF方案化疗和（FOLFOX或DF方案）两组中表达无统计学差异p＞ 0.05。
　　3、 TIMP3表达与临床病理的关系:TIMP3表达高低与年龄、性别、化疗后的效果评估、肿瘤部位、分化程度、化疗方案、病理消退评分、肿瘤大小、术后T分期、术后N分期、术后病理分期、是否侵犯神经、有无脉管癌栓，吸烟，喝酒，术前 是否应用抗生素之间均无统计学差异p＞ 0.05。
　　4、新辅助化疗胃癌组织TIMP3表达和微环境肿瘤相关巨噬细胞表达之间的关系，相关性分析发现在新辅助化疗胃癌组织中TIMP3表达和微环境肿瘤相关巨噬细胞表达成负相关p=0.002，r=-0.36，95％CI-0.54至-0.14，R2=0.13。
　　5、单因素分析新辅助化疗胃癌患者TIMP3高表达患者5年OS预后好p＜0.05;微环境肿瘤相关巨噬细胞高表达患者5年OS预后差有统计学差异p＜0.05。
　　6、多因素分析75例胃癌患者接受新辅助治疗后行根治性D2淋巴结切除，TIMP3和微环境TAMs为独立的以预后因素p＜0.05。95％区间为0.18-0.79和0.17-0.68。
　　结论:本研究结果提示，胃癌组织TAMs密度增加和TIMP3低表达与不良的临床结果有关。肿瘤细胞中TIMP3的过表达与TAMs可能存在负相关。新辅助化疗胃癌组织中TIMP3和TAMs浸润是新辅助化疗胃癌独立的预后因素，新辅助化疗胃癌组织中TIMP3高表达预后较好，相反TAMs浸润密度增加的预后较差。
　　研究发现:1、TIMP3和微环境肿瘤相关巨噬细胞在DOF方案化疗和（FOLFOX或DF方案）两组中表达无差异。
　　2、在新辅助化疗胃癌组织中TIMP3表达和微环境TAMs表达成负相关。
　　3、辅助化疗胃癌患者TIMP3高表达预后好微环境TAMs高表达患者预后差。新辅助化疗胃癌组织中TIMP3和微环境TAMs是新辅助化疗胃癌独立的预后因素，新辅助化疗胃癌组织中TIMP3高表达预后较好，相反TAMs浸润密度增加的预后较差。

目录

声明

摘要

符号说明

第一部分 胃癌患者循环炎性标志对新辅助化疗预后影响的分析研究

前言

材料与方法

结果

讨论

附表

附图

第二部分 微环境巨噬细胞与TIMP3对胃癌新辅助化疗预后影响的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

附表

附图

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

英文文章