BNP、PKG在慢性非细菌性前列腺炎大鼠模型L6-S1背神经节中的表达及其意义

摘要

目的：
　　通过前列腺内注射完全弗氏佐剂（Complete Freund's adjuvant, CFA）建立稳定的大鼠慢性非细菌性前列腺炎（Chronic nonbacterial prostatitis, CNP）模型，采用实时荧光定量PCR、Western-blot检测实验组及对照组脊髓L6-S1背神经节(Dorsal ganglion, DRG)中脑钠尿肽（B-type Natriuretic peptides, BNP）、蛋白激酶G（Protein Kinase G, PKG）的表达和大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型BNP鞘内注射后L6-S1背神经节中PKG的表达，初步探讨BNP、PKG与慢性前列腺炎/骨盆疼痛综合征（CP/CPPS）之间的关系。
　　方法：
　　第一部分：
　　1、选择雄性SD大鼠80只，适应性饲养1周后，随机分为8组，每组10只：对照组：给予前列腺内注射0.1ml生理盐水，包含3d组、7d组、10d组、14d组四个亚组；实验组：给予前列腺内注射0.1ml CFA，包含3d组、7d组、10d组、14d组四个亚组。
　　2、通过荧光定量PCR、Western-blot检测实验组、对照组SD大鼠脊髓L6-S1背神经节中BNP、PKG的表达情况。
　　第二部分：
　　1、选择雄性SD大鼠150只，适应性饲养1周后，随机分为三组：前列腺内注射CFA+鞘内注射生理盐水组、前列腺内注射CFA+鞘内注射BNP组、前列腺内注射生理盐水+鞘内注射生理盐水组。于CFA前列腺内注射后第7天建立稳定的慢性非细菌性前列腺炎模型（CNP）后给予鞘内注射，每组包含5个亚组，分别给予连续鞘内注射1d、2d、3d、4d、5d。
　　2、BNP组给予鞘内注射BNP，其余各组均给予鞘内注射生理盐水，连续注射1d、2d、3d、4d、5d后分别提取L6-S1脊髓背神经节。
　　3、采用实时荧光定量PCR、Western-blot检测各组大鼠在连续鞘内注射1d、2d、3d、4d、5d后脊髓L6-S1背神经节中PKG的表达变化。
　　结果：
　　1、采用荧光定量PCR、Western blot检测第一部分中实验组、对照组SD大鼠脊髓L6-S1神经节中BNP、PKG的表达，实验结果显示实验组中3d组、7d组、10d组、14d组脊髓 L6-S1神经节中 BNP、PKG表达上调，其中7d、10d组上调较明显，差异具有统计学意义（p<0.05）。
　　2、采用荧光定量PCR、Western-blot检测第二部分中前列腺内注射CFA+鞘内注射生理盐水组、前列腺内注射 CFA+鞘内注射 BNP组、前列腺内注射生理盐水+鞘内注射生理盐水组SD大鼠脊髓L6-S1神经节中PKG的表达，结果显示：前列腺内注射CFA+鞘内注射BNP组SD大鼠脊髓L6-S1神经节中PKG的表达较对照组上调，差异具有统计学意义（p<0.05）。
　　结论：
　　大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型脊髓L6-S1神经节中BNP、PKG的表达较对照组升高，给予鞘内注射BNP，可上调大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型L6-S1背神经节中的PKG的表达。BNP/NPR-A/PKG/BKca信号通路可能参与慢性前列腺炎性疼痛的发生、维持与调控。

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中英文缩略词表

第1章 前言

第2章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要的仪器设备

2.1.3 主要的试剂

2.2 实验方法及步骤

2.2.1 第一部分

2.2.2 第二部分

2.3 统计学数据分析

第3章 结果

3.1 大鼠前列腺注射CFA后L6-S1背神经节中BNP、PKG的mRNA的表达量变化。

3.2 大鼠前列腺注射CFA后L6-S1背神经节中 BNP、PKG的蛋白质的表达量变化。

3.3 大鼠慢性前列腺炎模型鞘内注射BNP后L6-S1背神经节中PKG的mRNA的表达量变化。

3.4 大鼠慢性前列腺炎模型鞘内注射BNP后L6-S1背神经节中PKG的蛋白质的表达量变化。

第4章 讨论

4.1 慢性前列腺炎的发病及治疗现状

4.2 慢性前列腺性疼痛与神经调控的关系

4.3 BNP/NPR-A/PKG/BKca信号通路与炎性疼痛

4.4 BNP/NPR-A/PKG/BKca信号通路与慢性前列腺炎疼痛

第5章 结论

致谢

参考文献

附图

综述:慢性前列腺炎疼痛机制研究进展