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TGF-β及其Ⅰ型受体在三角帆蚌免疫应答和创伤修复中的作用

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缩略语表

第1章 引言

1.1 TGF-β信号通路

1.1.1 TGF-β亚家族

1.1.2 TGF-β受体

1.1.3 TGF-β信号的功能

1.1.4 TGF-β信号的调节

1.1.5 TGF-β信号在免疫中的作用

1.1.6 TGF-β信号在组织损伤修复中的作用

1.2本研究的目的和意义

第2章 三角帆蚌TGF-β及其Ⅰ型受体基因克隆、原核表达及在创伤修复中的作用

2.1 前言

2.2材料与方法

2.2.1 实验材料

2.2.2 菌种和cccDNA

2.2.3 实验仪器

2.2.4 实验试剂

2.2.5引物表

2.2.6 微生物刺激及创伤修复试验和抑制阻断实验

2.2.7 总RNA的提取

2.2.8 SMART cDNA的合成

2.2.9 HcTGF-β和TGF-βRⅠ基因的克隆

2.2.10 TGF-β基因和TGF-βRⅠ基因的生物学分析

2.2.11 TGF-β和TGF-βRⅠ基因的原核表达

2.2.12 TGF-βRⅠ基因胞内段的原核表达

2.2.13 TGF-β及TGF-βRⅠ的多克隆抗体制备

2.2.15 TGF-β及TGF-βRⅠ Western blotting检测

2.2.16重组蛋白TGF-β活性测定

2.3 实验结果

2.3.1三角帆蚌的总RNA

2.3.2 HcTGF-β基因的RACE实验和HcTGF-βRⅠ基因片段克隆

2.3.3 HcTGF-β和HcTGF-βRⅠ基因cDNA全长序列及推导的氨基酸序列

2.3.4 预测的HcTGF-β和HcTGF-βRⅠ蛋白序列的生物信息学分析

2.3.5 推导HcTGF-β和HcTGF-βRⅠ氨基酸序列比对

2.3.6 TGF-β和TGF-βRⅠ基因的系统进化树

2.3.7 HcTGF-βRⅠ基因的组织表达

2.3.8 嗜水气单胞菌和肽聚糖刺激后HcTGF-βRⅠ基因在肝胰脏、血细胞组织中的表达

2.3.9创面组织TGF-βRⅠ基因的表达变化

2.3.10 SB431542处理三角帆蚌后TGF-β/Smads信号通路下游基因表达变化

2.3.11 TGF-β基因在大肠杆菌中的表达及纯化

2.3.12 TGF-βRⅠ基因在大肠杆菌中的表达及纯化

2.3.13 多克隆抗体的制备及ELISA检测

2.3.14 Western blotting检测

2.3.15 重组蛋白TGF-β活性测定

2.4 讨论

第3章 结论与展望

3.1 结论

3.2展望

致谢

参考文献

攻读学位期间的研究成果

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