流式细胞术检测血小板微颗粒方法学探讨

摘要

[目的]应用流式细胞术(FCM)-富含血小板血浆(PRP)法检测血小板微颗粒(PMPs)，并进行方法学、影响因素探讨及临床意义的评价。 [方法]采用PRP，应用血小板特异性荧光抗体CD61-FITC标记血小板，并以0.82μm标准微球进行定位对照和设置机器检测条件，调节机器阈值，设门计数PMPs占CD61阳性颗粒的百分比。以ADP及胶原诱导血小板活化，计数活化以后血小板释放的PMPs，作为阳性对照，评价该方法的可行性，同时探讨了不同抗凝剂抗凝PRP，不同保存时间等对PMPs检测的影响。 [结果]检测30例健康对照者静息状态下血小板释放的PMPs为2.19％±0.48％，血小板活化后释放的PMPs数量显著增加；ADP活化以后血小板产生的PMPs为5.43％±3.48％，胶原活化以后血小板释放的PMPs为3.46％±1.14％，提示静息状态和激活后PMPs差异有显著意义(P＜0.01)。应用109mmol/L枸橼酸钠和CTAD(枸橼酸钠0.11mol/L，茶碱15mmol/L，ERIAAF3.7mmol/L，潘生丁0.198mmol/L)抗凝样本，检测结果显示CTAD抗凝PRP静息状态下血小板释放PMPs的量显著低于枸橼酸钠抗凝PRP释放PMPs量。另外标本存放时间对PMPs检测有较大影响。37例血栓性疾病患者检测结果提示血小板释放的PMPs的量均显著高于正常对照组(P＜0.01)。 [结论]采用流式细胞术富含血小板血浆法检测PMPs方法可行，并且其操作简单、影响因素相对较少，比较适合临床常规检测。同时PMPs的检测是检测血小板活化的一个重要指标，而血小板活化对于早期诊断血栓性及出血性疾病具有重要意义。

目录

摘要

前言

材料及方法

结果

讨论

参考文献

附照

综述 血小板微颗粒的检测方法学研究及其临床意义

致谢