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摘 要
第二章 SW480细胞中差异表达miR-18a-5p及其靶基因筛选与鉴定
2.1 引言
2.2 材料与方法
2.2.1 实验材料
2.2.3主要试剂配制
2.2.4 miR-18a-5p的靶基因预测并筛选
2.2.5构建真核miRNA质粒表达载体及质粒DNA抽提
2.2.6细胞培养
2.3过表达miR-18a-5p模拟物转染SW480细胞
2.3.1利用荧光倒置显微镜观察SW480细胞的转染效果
2.3.2提取转染SW480细胞总RNA
2.3.3细胞总RNA的浓度、纯度及完整性检测
2.3.4 qRT-PCR法检测miR-18a-5p表达水平及转染效率
2.3.5合成 microRNA的特异性引物
2.4统计学分析
2.5 结果与分析
2.5.1利用荧光倒置显微镜观察转染SW480细胞的转染效果
2.5.2细胞总RNA的浓度、纯度及完整性鉴定
2.5.3 qRT-PCR法检测过表达miR-18a-5p相对表达量及转染效率
2.6 讨论与分析
第三章 过表达miR-18a-5p模拟物转染结肠癌SW480细胞增殖与凋亡的研究
3.1引言
3.2 实验材料与方法
3.2.1 实验材料
3.2.2 实验方法
3.2.3 细胞培养
（相同第二章2.2.6）
3.2.4 过表达miR-18a-5p模拟物转染SW480细胞的增殖抑制作用
3.2.5过表达miR-18a-5p模拟物转染SW480细胞诱导凋亡作用
3.2.6 统计学方法
3.3.1 过表达miR-18a-5p模拟物转染SW480细胞增殖抑制作用
3.3.2过表达miR-18a-5p模拟物诱导SW480细胞凋亡作用
3.4讨论与分析
第四章 过表达miR-18a-5p 模拟物转染SW480细胞中靶
基因mRNA转录水平的影响
4.1 引言
4.2 实验材料与方法
4.2.1实验材料和主要试剂
4.2.2实验方法
4.2.3细胞培养
4.2.4 过表达miR-18a-5p模拟物转染SW480细胞
4.2.5转染SW480细胞总RNA的提取
4.2.6 转染SW480细胞总RNA浓度、纯度、及其完整性检测
4.2.7 实时荧光定量qRT-PCR实验
4.2.8 统计学分析
4.3结果与分析
4.3.1 转染SW480细胞提取总RNA浓度及纯度检测
4.3.2 荧光定量qRT-PCR检测靶基因mRNA相对表达水平
4.4讨论与分析
第五章 过表达miR-802模拟物转染SW480细胞中
靶基因mRNA表达量
5.1引言
5.2实验材料与方法
5.2.1实验材料和主要试剂
5.3 实验方法
5.3.1 细胞培养
5.3.2 过表达miR-802模拟物转染SW480细胞
5.3.3 转染SW480细胞总RNA的提取
5.3.4 统计学分析
5.4.1 利用荧光倒置显微镜观察转染SW480细胞
5.4.3 qRT-PCR法检测过表达miR-802相对表达量及转染效率
5.4.4 qRT-PCR法检测miR-802靶基因的mRNA相对表达水平
5.5.1过表达miR-802模拟物转染SW480细胞后上调表达的靶基因
5.5.2 过表达miR-802模拟物转染SW480细胞后下调表达的靶基因
6.1 引言
6.2材料与方法
6.2.1实验主要仪器设备和试剂
6.3 实验方法
6.3.1 Transwell法检测细胞侵袭实验
6.6讨论与分析
全文总结
参考文献
在读期间发表论文情况
致谢
