c-Abl酪氨酸激酶介导ANGⅡ诱导的血管平滑肌细胞凋亡和表型转变

摘要

目的：血管平滑肌细胞（VSMCs）可通过旁分泌效应作用于主动脉外膜组织，保持主动脉壁对于炎症和蛋白水解作用的抵御力，在维系主动脉壁稳定性方面具有重要作用，Abelson酪氨酸激酶（c-Abl）与血管平滑肌细胞生物学行为密切相关。本实验目的是探究c-Abl酪氨酸激酶对血管紧张素II（AngII）刺激的VSMCs的影响。
　　方法：细胞实验：构建c-Abl基因过表达或沉默的慢病毒载体，分别转染VSMCs，用AngII干预已转染病毒或c-Abl激活抑制剂STI571预处理的VSMCs；动物实验：利用渗透泵定速释放AngII的方法，构建野生c57和c-Abl基因敲除小鼠(c-Abl-/+)夹层动脉瘤模型，观察夹层动脉瘤发生率。利用western、免疫荧光、流式技术等方法，检测细胞实验的VSMCs和动物实验小鼠主动脉组织的平滑肌细胞表型标志物、细胞凋亡及氧化应激产物等的改变，并分析酪氨酸激酶c-Abl和AngII刺激的VSMCs凋亡、表型转变及氧化应激改变的之间相关性。
　　结果：AngII刺激后，VSMCs由收缩型向分泌型转变，细胞凋亡、氧化应激产物较生理盐水刺激组均增加（n=3, p均<0.01）。c-Abl基因过表达的VSMCs受到AngII刺激后，表型转变程度、细胞凋亡率及氧化应激产物较对照组增加显著（n=3, p均<0.01），而c-Abl基因沉默组或STI571预处理后的VSMCs此种表型转变、细胞凋亡率及氧化应激产物增长水平均较对照组有所降低（n=3, p均<0.05）。c-Abl-/+小鼠较c57小鼠在AngII定速给药14天后，夹层动脉瘤的发生概率减低（n=10, p<0.05），表型转变、细胞凋亡率及氧化应激产物增加程度均有下降（n=3, p均<0.05）。
　　结论：c-Abl酪氨酸激酶活性的增加与AngII刺激后VSMCs向分泌型转变程度、细胞凋亡率、氧化应激效应呈正相关。

目录

声明

文缩略词表

前言

材料与方法

一、实验材料

二、研究项目及实验方法

实验结果

一、AngII激活小鼠VSMCs的c-Abl磷酸化

二、构建稳定过表达及沉默c-Abl的VSMCs细胞系

三、AngII对VSMCs表型转化的影响

四：c-Abl激酶对AngII刺激下的VSMCs表型转化的影响

五：c-Abl对AngII刺激下的VSMCs凋亡影响

六：c-Abl对AngII刺激下的VSMCs氧化应激的影响

七：AngII导致VSMCs表型转变的可能信号通路

八：AngII灌注小鼠主动脉夹层动脉瘤模型的建立

九：各实验组小鼠VSMCs标志蛋白、凋亡及相关信号通路检测

讨论

参考文献

综述:主动脉壁的关键组份以及它们在主动脉夹层发病机制中的作用

致谢