辛伐他汀对血管生成素的调节作用及对小鼠急性移植物抗宿主病的影响

摘要

目的：探讨辛伐他汀（simvastatin）对小鼠异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后组织及外周血Angiopoietin水平及急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）的影响。
　　方法：以C57BL/6(H-2b)为供鼠，受鼠Balb/c（H-2d）经致死剂量（8.0Gy）照射后，aGVHD组经尾静脉输入供鼠骨髓及脾脏细胞，非aGVHD对照组单纯输入骨髓细胞。移植前一天开始给予辛伐他汀灌胃，至移植后第7天。观察小鼠的体重变化、生存情况，取肝、小肠进行病理检测，移植后第4、8、12、16天取小鼠外周血检测血管生成素1（Angiopoietin-1，Ang-1)及Ang-2水平，分离小鼠胸主动脉，免疫组化检测Ang-1及Ang-2表达。体外培养EA.hy926细胞，分别给予TNF-?及TNF-?联合辛伐他汀处理，用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测培养上清的Ang-1及Ang-2水平，实时定量PCR（RT-PCR）及western blot检测细胞Ang-1及Ang-2的基因及蛋白表达水平。
　　结果：辛伐他汀小鼠灌胃后明显提高移植后生存率，减轻GVHD症状。移植后aGVHD组小鼠外周血Ang-1水平逐渐下降，Ang-2水平逐渐升高，辛伐他汀能明显升高Ang-1并降低Ang-2水平（p<0.05）。免疫组化显示移植后aGVHD组小鼠血管原位Ang-1及Ang-2水平明显降低，辛伐他汀处理显著提升Ang-1及Ang-2水平。EA.hy926细胞经TNF-?刺激后，细胞上清Ang-1水平降低，Ang-2水平升高（p<0.05），细胞Ang-1的mRNA及蛋白水平均明显降低，Ang-2的mRNA及蛋白水平明显升高（p<0.05）。预先经辛伐他汀处理能明显增加细胞上清Ang-1浓度及细胞Ang-1的mRNA及蛋白水平（p<0.05），同时降低细胞上清的Ang-2浓度（p<0.05），对细胞Ang-2的mRNA及蛋白表达水平无显著性影响。
　　结论：异基因骨髓移植后小鼠体内Ang-1的生成降低，Ang-2的生成及释放明显增多，辛伐他汀通过提高Ang-1的生成并减少Ang-2释放来减轻小鼠aGVHD症状，提高移植后小鼠的生存率。

目录

声明

英文缩略词简表

第一部分建立小鼠GVHD骨髓移植模型

前言

材料方法

结果

讨论

参考文献

第二部分辛伐他汀对血管生成素的调节作用及对小鼠急性移植物抗宿主病的影响

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

综述:内皮损伤在造血干细胞移植中的研究进展

致谢

附录1攻读博士学位期间发表文章与会议报告