声明
英文缩略词表
一、前言
二、材料和方法
1. 试剂和仪器
1.1.主要试剂
1.2.仪器
1.3.试剂配制
1.4.实验动物
2.实验方法
2.1心脏瓣膜成肌纤维细胞的分离培养
2.2 兔瓣膜肌成纤维细胞的免疫荧光鉴定
2.3 TNF-α对心脏瓣膜肌成纤维细胞细胞毒性的影响
2.4. 细胞分组和处理
2.5 ALP试剂盒检测兔心脏瓣膜肌成纤维细胞的ALP活性情况
2.6免疫蛋白印迹法(WB)检测瓣膜肌成纤维细胞中 RUNX2、α-SMA及 β-catenin表达情况
2.7逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测myofibroblast中RUNX2和β-catenin的表达情况
3.统计学分析
三、结果
1、细胞的形态和鉴定
1.1 细胞形态
1.2兔瓣膜肌成纤维细胞的免疫荧光鉴定
2、TNF-α对心脏瓣膜肌成纤维细胞细胞毒性的影响
3、ALP活性检测结果
4、Western blotting检测结果
4、PCR检测结果
四、讨论
参考文献
综述:钙化性主动脉瓣膜疾病的机制研究
参考文献
致谢