声明
英文缩略词表
前言
实验材料
一、实验仪器设备(型号)
二、主要试剂及配制方法
3. 质粒
4. 细胞培养及相关试剂
5. 重组腺病毒的制备
6. Western-blot 相关试剂及配制方法
7. 实时荧光定量PCR相关试剂
8. 免疫组化相关试剂
实验方法
一、 细胞相关操作
二、 重组腺病毒的制备
三、 Western-blot 检测蛋白表达
四、 动物实验
1. 转基因C57/BL6小鼠移植瘤生长模型
2. VEGF促血管生成动物试验
3.TR3 shRNAs影响移植瘤生长试验
五、 免疫组织化学染色
1. 免疫组织化学显色(HRP)
2. 免疫荧光化学染色
六、 实时荧光定量PCR
1. 组织RNA的提取(TRIzol法)
2. RNA鉴定
3.RNA逆转录为cDNA(NEB M-MuLV逆转录试剂盒M0253S)
4. Realtime-PCR (Roche)
结果
1. TR3/Nur77调控肿瘤的生长及转移
2. TR3/Nur77高表达于人肿瘤及血管组织中,但在癌旁组织中不表达
3. TR3/Nur77衍生分子Flag-TR3-M1、Flag-TR3-M3p、shTR3-176、shTR3-297抑制内皮细胞及肿瘤细胞的增殖和迁移
4. TR3/Nur77衍生分子Flag-TR3-M1、Flag-TR3-M3p、shTR3-176、shTR3-297抑制VEGF促进的皮下血管新生
5. TR3/Nur77衍生分子Flag-TR3-M1、Flag-TR3-M3p、shTR3-176、shTR3-297抑制裸鼠移植瘤的生长
6. TR3/Nur77衍生分子Flag-TR3-M1、Flag-TR3-M3p、shTR3-176、shTR3-297抑制裸鼠移植瘤的血管新生
讨论
全文小结
附图表
综述:TR3/Nur77的潜在靶点价值在肿瘤研究中的进展
致谢
附录