中药六君子汤对慢性支气管炎模型大鼠气道炎症及细胞免疫影响的研究

摘要

目的：1.建立慢性支气管炎大鼠模型，阐明中药六君子汤对慢性支气管炎模型大鼠组织病理的影响；2.检测ICAM-1、NF—κB在慢性支气管炎大鼠血清中的表达，探讨二者在慢性支气管炎气道炎症中的作用，并阐明六君子汤治疗后对以上指标的影响；3.检测细胞免疫因子CD4+、CD8+及IFN—γ在慢性支气管炎大鼠血清中的表达，阐明六君子汤对免疫器官胸腺的作用及对上述指标的影响。最终，为将来利用中药辅助治疗慢性支气管炎提供一定的理论依据。 方法：⑴模型制备根据《实用中医候证动物学》中的方法，即SaO2烟熏法，建立大鼠慢性支气管炎模型。⑵分组与给药随机将大鼠分为慢性支气管炎生理盐水对照组(生理盐水对照组)、慢性支气管炎六君子汤治疗组(六君子汤治疗组)，各15只。自第15天起，予以治疗组大鼠六君子汤灌胃，对照组则予以等体积生理盐水。⑶样本血采集对大鼠行心脏穿刺采血，分别是EDTA抗凝和非抗凝血，分离血清—20℃保存。⑷取材与固定将大鼠断颈处死，解剖摘取胸腺并称重；解剖摘取气管及肺组织，固定、石蜡切片、HE染色、光学显微镜观察。⑸荧光定量PCR技术采用荧光定量PCR技术检测大鼠血清中的NF—κB、ICAM-1、IFN—γ。⑹流式细胞检测采用流式细胞技术检测大鼠的血清中CD4+、CD8+。 结果：①模型大鼠达到慢性支气管炎一般病理学改变。六君子汤治疗后大鼠各级气道纤毛倒伏粘连、上皮细胞变性坏死、杯状细胞增生均比慢性支气管炎模型组及生理盐水对照组减轻，炎性渗出物明显减少、肺泡壁重建、肺泡毛细血管网丰富，肺内细支气管、终末细支气管管腔狭窄、炎细胞浸润、小动脉平滑肌增生情况也均较模型组及生理盐水对照组明显改善。②六君子汤治疗组大鼠的胸腺系数较生理盐水对照组大鼠的胸腺系数明显增加(P<0.05)。③慢性支气管模型组大鼠的ICAM-1、NF—κB均较正常组明显升高(P<0.05)；经过六君子汤治疗后，治疗组大鼠血清ICAM-1较生理盐水对照组明显下降(P<0.05)；NF—κB的阳性表达也较生理盐水对照组有下降趋势(P<0.1)。④慢性支气管炎大鼠CD4+/CD8+比值及IFN—γ与正常对照组大鼠相比显著下降(P<0.05)；经过六君子汤治疗后，CD4+/CD8+比值明显升高(P<0.05)，但IFN—γ与对照组相比，无明显的统计学意义(P>0.05)。 结论：⑴六君子汤能减轻慢性支气管炎大鼠气管和肺组织损伤程度，因此慢性支气管炎的治疗应充分重视本虚标实的病理本质及痰瘀交互为患的危害性。⑵因为ICAM-1基因启动子存在有NF—κB等转录因子的结合位点，NF—κB与ICAM-1在调节方向一致，与组织病理变化也有较好的相关性；慢性支气管炎大鼠血清中NF—κB表达上调，而六君子汤能够通过下调NF—κB，从而在转录水平上抑制ICAM-1的表达。⑶慢性支气管炎发生发展过程中存在Th1/Th2比值失调、免疫应答的失衡；六君子汤能促进胸腺细胞的生长及分化，经过六君子汤治疗后，Th1细胞功能恢复，促进Th1分泌的细胞因子释放增多，Th1/Th2比值有所恢复、机体细胞免疫功能得到改善；但是，本研究发现六君子汤对血清γ—干扰素的表达没有影响，可能与γ—干扰素的生物特性有关。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

1.慢性支气管炎的定义和流行病学

2.慢性支气管炎的病因

3.慢性支气管炎的气道炎症

4.慢性支气管炎的细胞免疫

5.慢性支气管炎的中医学观点

6.六君子汤治疗慢性支气管炎的研究

研究目的和意义

材料与方法

1.材料

2.方法

结果

1.一般状况

2.各组大鼠气道病理改变

3.胸腺系数的检测结果

4.ICAM-1的检测结果

5.NF-κB的检测结果

6.IFN-γ的检测结果

7.CD4+、CD8+的检测结果

讨论

1.六君子汤改善慢性支气管炎气道肺组织病理的研究

2.六君子汤改善慢性支气管炎气道炎症的研究

3.六君子汤提高慢性支气管炎细胞免疫的研究

结论

展望

参考文献

附 图

致谢