供肝NK细胞对肝移植大鼠外周血淋巴细胞亚群的影响

摘要

目的：研究供体肝脏NK细胞在同种异体大鼠肝脏移植中的作用，以及比较外周血中淋巴细胞亚群的变化，初步探索供肝NK细胞在肝移植免疫中的可能机制。
　　 方法：运用改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型，以Lewis-BN近交系大鼠为急性排斥组，BN-Lewis近交系大鼠为天然耐受组，并应用Co60射线照射清除供体免疫细胞及经门静脉供肝NK细胞回输等技术，设立6个大组：A.天然耐受组(BN-Lewis)；B.BN-Lewis+供体Co60照射(Co60-BN-Lewis)；C.BN-Lewis+供体Co60照射+受体门静脉输注供肝NK细胞(Co60-BN-Lewis+donor NK cells)；D.急性排斥组(Lewis-BN)；E.Lewis-BN+供体Co60照射(Co60-Lewis-BN)，F.Lewis-BN+供体Co60照射+受体门静脉输注供肝NK细胞(Co60-Lewis-BN-donor NK cells)。根据不同观察时间点分别于术后1、3、7天切取移植肝用于病理学分析，同时收集外周血，血清用于检测肝功能指标、IL-2水平，全血行流式检测淋巴细胞亚群情况。另外设亚组观察移植后一般情况和自然存活时间。
　　 结果：BN-Lewis耐受组中，B、C组平均存活时间较A组缩短，但3组间差异比较无统计学意义(P＞0.05)；3组中，A组术后一般情况恢复最好，移植相关并发症发生率最低，C组其次，B组最差，其中B组并发症发生率与A组、C组比较均有统计学意义(P＜0.05)。Lewis-BN排斥组中，E、F组平均存活时间较D组明显缩短，3组间两两比较均有统计学意义(P＜0.05)；3组中，D组术后一般情况恢复最好，移植相关并发症发生率最低，F组其次，E组最差，其中E组并发症发生率与D组、F组比较均有统计学意义(P＜0.05)。
　　 回输供肝NK细胞移植组术后血清转氨酶升高，于术后第3天达到峰值，之后开始下降。未行NK细胞输注的其他移植组中，均未见术后第3天的肝功能破坏现象。与之相应，回输供肝NK细胞组引起移植术后胆红素的升高，变化趋势与其他移植组别相似，都呈逐渐上升趋势，但F组术后第7天升高幅度较其他组别明显。
　　 移植肝组织Banff标准评分：各组的排斥反应有一相似的趋势，随移植后时间延长，急性排斥反应加重。术后第7天，各组排斥反应均达到高峰。耐受组中，B组排斥反应最重，其余两组为中度排斥；排斥组中，E组和F组为重度排斥，D组为中度排斥反应。
　　 回输供肝NK细胞引起CD4+CD25+Treg比例升高：耐受组中，C组第3、7天与A组、B组相应时间点相比，该比例均明显升高。排斥组中，F组第7天与D组、E组相应时间点相比，该比例均明显升高。差异均有统计学意义(P＜0.05)。
　　 回输供肝NK细胞引起受体CD3+CD8+T细胞比例下降：耐受组中，第1、7天C组与A组，第7天C组与B组相比，CD3+CD8+T细胞比例比例明显下降。排斥组中，第7天F组与D组，第3、7天F组与E组相比，该比例明显下降。差异均有统计学意义(P＜0.05)。回输供肝NK细胞引起受体CD3+CD4+/CD3+CD8+T细胞比值升高与受体CD3+CD8+T细胞比例下降的趋势呈反方向一致性。
　　 回输供肝NK细胞下调血清IL-2水平：耐受组中，第3、7天C组与B组比较，血清IL-2水平明显降低。排斥组中，第7天F组与E组比较，血清IL-2水平明显下降。差异均有统计学意义(P＜0.05)。回输供肝NK细胞移植组与相应的清除供肝免疫细胞的移植组，血清IL-2水平的降低与外周血CD4+CD25+Treg比例的升高呈反方向一致性。
　　 结论：
　　 1.供肝NK细胞能减轻肝移植术后早期的急性排斥反应，从而延长受鼠远期存活时间或提高远期存活率，且可以改善移植术后生存质量及促进术后一般情况恢复，减少并发症的发生率。
　　 2.供肝NK细胞通过上调CD4+CD25+Treg比例来减轻移植肝淋巴细胞浸润、降低CD3+CD8+T细胞比例及移植物内IL-2水平，在肝脏移植免疫中发挥调节作用，从而下调受体细胞免疫水平，减轻早期的急性排斥反应损伤。

目录

文摘

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第一节前言

第二节材料与方法

第三节结果

第四节讨论

第五节结论

参考文献

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