声明
第一章 前 言
1.1 转基因技术
1.2 苏云金芽胞杆菌
1.3 转基因作物
1.4 标准物质
1.4.1 标准物质的分类
1.4.2 转基因生物标准物质
1.5 蛋白纯化层析技术
1.5.1 排阻色谱法
1.5.2 离子交换色谱法
1.5.3 亲和色谱法
1.5.4 疏水相互作用色谱法
1.5.5 反相色谱法
1.6 研究的目的与意义
1.7 研究内容
第二章 Bt蛋白标准物质候选物的制备
2.1 试验材料
2.1.1 菌株
2.1.2 引物
2.1.3 酶与生化试剂
2.1.4 培养基与抗生素
2.1.5 缓冲液
2.1.6 仪器设备
2.2 试验方法
2.2.1 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的验证及提取
2.2.2 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的活化条件
2.2.3 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的纯化
2.2.4 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白纯度测定
2.2.5 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的氨基酸序列测定
2.2.6 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的分子量测定
2.3 结果与讨论
2.3.1 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的验证及提取
2.3.2 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的活化条件
2.3.3 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的纯化
2.3.4 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白纯度测定
2.3.5 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的氨基酸序列测定
2.3.6 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的分子量测定
2.4 小结
第三章 Bt蛋白标准物质的研制
3.1 试验材料
3.1.1 生化试剂
3.1.2 缓冲液
3.1.3 仪器设备
3.2 试验方法
3.2.1 Bt蛋白标准物质的分装
3.2.2 Bt蛋白水解时间的测定
3.2.3 Bt蛋白的均匀性测定
3.2.4 Bt蛋白的稳定性测定
3.2.5 Bt蛋白的定值
3.2.6 Bt蛋白定值结果的不确定度评价分析
3.3结果与讨论
3.3.1 Bt蛋白标准物质的分装
3.3.2 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白水解时间的测定
3.3.3 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的均匀性测定
3.3.4 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的稳定性测定
3.3.5 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白的定值
3.3.6 Cry1Ah蛋白与Cry1Ab/c蛋白定值结果的不确定度评价
3.4 小结
第四章 结论与讨论
4.1结论
4.1.1 Bt蛋白纯化体系的建立
4.1.2 Bt蛋白氨基酸序列的测定
4.2讨论
参考文献
作者简介
致谢
