贵州产（切面红色）土茯苓抗类风湿性关节炎药效与机制研究

摘要

目的:本研究试图找到贵州产（切面红色）土茯苓抗类风湿性关节炎(RA)的有效部位，探讨该有效部位对RA的预防与治疗作用及部分作用机制。拟为贵州产（切面红色）土茯苓在临床应用及药物开发提供实验依据和理论基础。
　　方法:运用小鼠毛细血管通透性模型和小鼠棉球肉芽肿模型筛选到贵州产（切面红色）土茯苓的抗炎及可能抗RA的有效部位，通过小鼠急性毒性实验及小鼠棉球肉芽肿模型量效关系实验，明确该部位的毒性及给药剂量;通过建立去肾上腺大鼠一般炎症模型及佐剂性关节炎(AA)大鼠原发性炎症模型，揭示该有效部位的部分抗炎机制;通过建立AA大鼠继发性炎症模型，观察预防性给药及治疗性给药对于AA大鼠体重、继发性足肿胀、关节炎指数、器官（脾脏、胸腺、肾脏、肾上腺）指数、踝关节X光摄片、关节病理切片以及血清NO、IL-1β、IL-6和TNF-α水平的影响，了解该有效部位干预RA的作用效果;采用Real Time-PCR技术及Western blot技术分别分析AA大鼠关节滑膜中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA及MyD88、IKKβ和p65蛋白的表达，探讨其干预RA的部分作用机制。
　　结果:贵州产（切面红色）土茯苓总黄酮对于小鼠毛细血管通透性模型和小鼠棉球肉芽肿模型的抑制率均最佳，其最大耐受量为70g/kg，抗炎最优剂量为0.20g/kg，并存在双向性的量效依赖性;该部位对去肾上腺大鼠角叉菜胶致足肿胀及棉球肉芽肿均具有显著抑制作用，同时能明显抑制AA大鼠原发性炎症模型的足肿胀度，持续下调其血清NO水平;该部位无论是预防性给药还是治疗性给药均能维持AA大鼠体重，抑制其继发性足肿胀，并下调其关节炎指数及器官（脾脏、胸腺、肾脏、肾上腺）指数，改善关节病理变化，同时亦能降低AA大鼠血清中NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的含量及降低AA大鼠关节滑膜中IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA及MyD88、IKKβ和p65蛋白的表达。
　　结论:上述实验结果表明，贵州产（切面红色）土茯苓抗炎及抗RA有效部位为其黄酮部位，该部位毒性较低并存在双向性的量效依赖性;其并通过下调血清中NO水平发挥抗炎作用，并且其发挥作用不依赖于下丘脑-垂体-肾上腺轴;其对AA大鼠继发性炎症具有良好的预防和治疗作用，并能通过下调致炎细胞因子水平，缓解AA大鼠继发性炎症症状;贵州产（切面红色）土茯苓总黄酮能抑制滑膜中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA的表达，减少IL-1β、IL-6和TNF-α的释放，并能通过影响滑膜组织的MyD88/NF-κB通路，达到治疗RA的目的。

目录

声明

摘要

前言

第一章 贵州产(切面红色)土茯苓抗炎有效部位筛选及其急性毒性与量效关系研究

第一节 贵州产(切面红色)土茯苓抗炎有效部位筛选

1 材料

2 方法

3 结果

第二节 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮急性毒性实验

1 材料

2 方法

3 结果

第三节 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮抗炎量效关系及最优剂量筛选

1 材料

2 方法

3 结果

4 本章小结

第二章 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮部位抗炎作用机制研究

1 材料

1．1 实验药物

1．2 动物

1．3 试剂

1．4 仪器

2 方法

2．1 去肾上腺大鼠抗炎实验

2．2 对大鼠佐剂性关节炎原发性炎症影响实验

2．3 统计学处理

3 结果

3．1 对去肾上腺大鼠角叉菜胶致急性足肿胀的影响

3．2 对去肾上腺大鼠棉球肉芽肿的影响

3．3 对AA大鼠原发性炎症的影响

3．4 对AA大鼠血清NO动态含量的影响

4 本章小结

第三章 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮对大鼠佐剂性关节炎干预作用研究

第一节 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮对大鼠佐剂性关节炎预防作用研究

1 材料

2 方法

3 结果

第二节 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮对大鼠佐剂性关节炎治疗作用研究

1 材料

2 方法

3 结果

4 本章小结

第四章 贵州产(切面红色)土茯苓总黄酮对大鼠佐剂性关节炎作用机制研究

1 材料

1．1 实验药物

1．2 动物

1．3 试剂

1．4 仪器

2 方法

2．1 分组及给药

2．2 动物模型建立

2．3 大鼠关节滑膜组织样本收集

2．4 大鼠关节滑膜TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA相对表达量测定

2．5 大鼠关节滑膜P65、IKKβ及MyD88蛋白表达测定

2．5 统计学处理

3 结果

3．1 对AA大鼠滑膜TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达水平的影响

3．2 对AA大鼠滑膜组织P65蛋白表达的影响

3．3 对AA大鼠滑膜组织IKKβ蛋白表达的影响

3．4 对AA大鼠滑膜组织MyD88蛋白表达的影响

4 本章小结

第五章 本课题总结、创新点及下一步实验计划

1 本课题总结

2 创新点

3 下一步实验计划

参考文献

综述

致谢

个人简历