声明
前言
一、LncRNA与肿瘤
二、LncRNA与乳腺癌耐药
第一部分 乳腺癌紫杉醇耐药细胞中lncRNA和mRNA表达谱筛选
引言
材料和仪器
1. 细胞系
2. 基因芯片
3. 主要试剂
4. 主要仪器
实验方法
1. 细胞培养
2. 细胞复苏
3. 细胞冻存
4. 细胞计数
5. LncRNA芯片筛选差异表达的lncRNAs和mRNAs
实验结果
1. 总RNA的质量检测
2. 芯片杂交结果
讨论
第二部分 lncRNA LINC00173在紫杉醇耐药诱导发挥的作用
引言
材料与仪器
1. 细胞系
2. 组织标本
3. 主要试剂
4. 主要仪器
实验方法
1. 细胞培养
2. 细胞总RNA的提取与鉴定
3. qRT-PCR检测相关基因的mRNA表达情况
4.Western blot检测相关基因蛋白的表达
5. 核质分离实验(提取RNA)
6. 划痕实验
7. Transwell实验(侵袭)
8. 平板克隆实验
9. CCK-8实验
10. 干扰片段的筛选
11. 过表达细胞株的构建
12. 统计学分析
实验结果
1. LINC00173的编码能力预测
2. LINC00173在乳腺癌组织及细胞系中低表达
3. LINC00173的亚细胞定位
4. LINC00173在耐药细胞系中表达下调及干扰片段的筛选和过表达的构建
5. LINC00173对乳腺癌细胞增殖和细胞集落形成的影响
6. LINC00173对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响
7. 过表达LINC00173可以增加耐药细胞对紫杉醇的敏感性
8. LINC00173可能通过调控β-catenin调节紫杉醇耐药
讨论
结论
参考文献
致谢
附录 A 英文缩略词
附录 B 主要试剂配制方法
附录 C 个人简历及发表文章
综述:PDGF与乳腺癌的发生及耐药的研究进展