静脉注射脂质体包裹的M蛋白基因治疗小鼠实验性肺转移肿瘤的实验研究

摘要

背景和目的：水泡性口炎病毒(VSV)基质(M)蛋白是VSV病毒颗粒的结构蛋白，可以直接诱导肿瘤细胞凋亡。本实验室初步证实转染M蛋白基因具有诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤生长的作用，可以作为肿瘤基因治疗的候选治疗基因。为此，我们利用实验性肺转移肿瘤动物模型，观察静脉注射脂质体包裹的M蛋白基因抑制实验性肺转移肿瘤结节形成的作用。 方法：用DOTAP:Chol脂质体包裹M蛋白基因和质粒空载体制备脂质体DNA复合物(Lip-MP和Lip-null)，以BALB/c小鼠建立CT26结肠癌实验性肺转移模型，将小鼠随机分为生理盐水(Saline)组、脂质体包裹空载体(Lip-null)组和脂质体包裹M蛋白基因(Lip-MP)组，在接种肿瘤细胞后第3天分别给予200ul Saline、200ul Lip-null(50ug DNA)和200ul Lip-MP(50ug DNA)等相应的处理，每2天1次，共6次。接种肿瘤细胞15天后每组随机处死5只小鼠，全肺称重，计数肺表面肿瘤转移结节数；其余10只观察小鼠生存期。HE染色评估全肺病理改变。TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡情况。为评价Lip-MP复合物对小鼠肝功能的影响，以正常昆明鼠为研究对象，尾静脉给予上述单剂量的不同处理，48小时后采集血清检测转氨酶ALT、AST水平。 结果：静脉注射脂质体包裹M蛋白基因(Lip-MP)组的肺表面结节数(60士19)明显少于Saline组(137士22)和Lip-null组(104士24)(p<0.05)。与Saline(25天)和Lip-null(29天)组的中位生存时间相比，Lip-MP(32天)对小鼠生存时间有延长作用(p<0.05)。TUNEL法检测肺转移肿瘤组织提示静脉注射Lip-MP复合物诱导了肿瘤细胞凋亡。与Saline和Lip-null组相比，血清转氨酶检测显示Lip-MP(50ug DNA)对小鼠转氨酶没有明显影响。 结论：静脉注射脂质体包裹的M蛋白基因对CT26结肠癌的肺转移结节形成有一定的抑制作用，为发展肿瘤基因治疗提供了新的思路。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

综述肿瘤基因治疗载体的研究概况

在读期间发表论文目录

致谢