平榛叶中黄酮类化合物的提取及成分分析

摘要

榛为桦木科(Betulaceae)榛属(Corylus)植物,主要分布于我国河北、山东、河南、陕西等地,我国榛的野生资源丰富,其中以平榛(Corylus heterophylla Fisch.)分布较多且较普遍。平榛叶中含有丰富的黄酮类化合物,但是对于平榛叶黄酮的研究少见报道,希望通过对平榛叶黄酮的成分及抗氧化活性等方面的研究,为开发、利用平榛叶资源提供一定的理论基础。
　　本课题包括四个部分:
　　(1)利用微波辅助提取法提取平榛叶中的黄酮类化合物,对微波提取平榛叶黄酮的工艺条件(乙醇浓度、料液比、微波温度、微波功率及提取时间)进行了研究,实验结果表明,微波提取平榛叶黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度为55％,料液比为1:35(g:mL),微波温度为80℃,微波功率为300 W,提取时间为5 min。
　　(2)通过静态吸附和解吸实验,从八种大孔树脂中筛选出了适合用于纯化平榛叶黄酮的树脂类型,确定了D101型大孔树脂是分离纯化平榛叶黄酮的最佳树脂。同时,通过动态实验对样品液流速、样品液pH、解析液pH、解析液乙醇浓度和解析液体积对 D101型大孔树脂的纯化效果进行了研究,确定了D101型大孔树脂纯化平榛叶黄酮的最佳工艺参数为:样品液流速2 BV/h、样品液pH值4、解吸液pH值4,解吸液乙醇浓度为70%,解吸液体积为3 BV。在此条件下,纯化后的平榛叶黄酮纯度提升至57.4%。
　　(3)利用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)分析方法,对平榛叶黄酮成分进行了定性、定量分析。共从中鉴定出12种化合物,其中11种为首次从平榛叶中发现,分别为表儿茶素(41.45±1.87μg/g)、绿原酸(3-咖啡酰奎宁酸,389.00±17.15μg/g)、丁香亭-3-O-葡萄糖苷(6169.78±209.73μg/g)、丹酚酸C(443.37±21.07μg/g)、金圣草黄素-6-C-葡萄糖苷(206.81±10.07μg/g)、金丝桃苷(槲皮素-3-O-半乳糖苷,154.44±7.63μg/g)、槲皮苷(槲皮素-3-O-鼠李糖苷,937.15±40.86μg/g)、西伯利亚落叶松黄酮-3-O-半乳糖苷(17.27±0.82μg/g)、锦葵色素-3-O-葡萄糖苷(202.74±10.04μg/g)、西伯利亚落叶松黄酮-3-O-葡萄糖苷(101.27±4.99μg/g)和山奈酚-3-O-鼠李糖苷(112.37±4.77μg/g)。
　　(4)利用细胞模型法对平榛叶黄酮的细胞内抗氧化活性进行了研究,结果表明,平榛叶黄酮不仅对HT-29和RAW264.7细胞的生长没有影响,而且具有良好的抗氧化能力,对HT-29和RAW264.7细胞内的活性氧(ROS)清除效果明显。此外,通过化学法对比平榛叶黄酮和人工抗氧化剂Vc的总抗氧化活性和清除自由基的能力,发现平榛叶黄酮在总抗氧化活性、清除超氧阴离子和清除 DPPH自由基的能力劣于 Vc,在清除羟自由基和抑制卵黄脂蛋白脂质氧化方面优于Vc。

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第一章 前 言

1.1 平榛叶概况

1.2 黄酮类化合物

1.3 课题研究的目的及意义

1.4 本课题所要攻克的问题

第二章 平榛叶黄酮的提取

2.1 引言

2.2 实验材料与仪器

2.3 实验方法及结果讨论

2.4 实验小结

第三章 平榛叶黄酮的纯化

3.1 引言

3.2 实验材料与仪器

3.3 实验方法及结果讨论

3.4 实验小结

第四章 平榛叶黄酮的定性与定量分析

4.1 引言

4.2 实验材料与仪器

4.3实验方法及结果讨论

4.4 实验小结

第五章 平榛叶黄酮抗氧化性的研究

5.1 引言

5.2 实验材料与仪器

5.3 实验方法及结果讨论

5.4 实验小结

第六章 结论与展望

参考文献

发表论文及参加科研情况说明

致谢