陕西省蔬菜根结线虫拮抗真菌的分离与筛选

摘要

根结线虫是农业生产中一类重要的病原物，严重威胁着农业生产，特别是随着保护地蔬菜种植面积的扩大，已成为大棚蔬菜生产中的最大障碍，其生物防治也越来越受到人们的广泛重视。 本研究从陕西省延安、渭南、西安、咸阳、杨凌、宝鸡、商洛等9个县市根结线虫发生严重的35个蔬菜地块采集根结线虫样品118份，通过直接分离法分别从根结线虫雌虫、卵囊和卵上共分离到拮抗真菌199株，除43株不产孢或疑难种未鉴定外，其余菌株经初步鉴定分属于镰刀菌属、拟头孢霉属、芽枝霉属、链格孢属和拟青霉属等22个属，其中镰刀菌分离频率最高，占分离总数的34％，为优势属，且不同地区间拮抗真菌的数目与种类也呈现较大差异性。 在离体条件下，通过测定菌株孢子悬浮液对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率对其中131株非镰刀菌拮抗真菌进行筛选，发现大多数菌株对根结线虫卵孵化都有一定的抑制作用，其中相对抑制率达60％以上的菌株有8株。菌株XPE-36对根结线虫卵具有较强的寄生性，相对抑制率达到82.3％，具有一定的生防潜能。 通过测定菌株发酵粗提液对南方根结线虫二龄幼虫的致死率对其中68株镰刀菌进行筛选，发现多数菌株对根结线虫二龄幼虫都具有一定的毒杀活性。其中菌株LGEM-5对根结线虫二龄幼虫的校正死亡率达到80.6％，7株镰刀菌的校正死亡率达到60～80％，具有较强的杀线虫活性。此外，还测定了菌株LGEM-5的发酵粗提液的热稳定性，发现该菌株发酵粗提液经热处理后仍保持了较高的杀线虫活性，具有良好的热稳定性。 根据形态学特征将菌株XPE-36鉴定为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)，LGEM-5鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。

目录

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第一章文献综述

1.1根结线虫病的发生与危害

1.2根结线虫的防治

1.2.1化学防治

1.2.2抗病品种的选育

1.2.3轮作

1.2.4生物防治

1.3食线虫菌物的研究历史与现状

1.3.1食线虫菌物国外研究简史

1.3.2我国食线虫菌物研究简史

1.3.3食线虫菌物的作用机制

1.3.4食线虫菌物的分类与资源

1.3.5根结线虫寄生性菌物研究进展

1.4根结线虫生物防治的基本类型

1.4.1自然生物防治

1.4.2引入生物防治

1.5根结线虫生物防治的问题与展望

1.6本研究的目的及意义

第二章陕西省蔬菜根结线虫拮抗真菌的分离与初步鉴定

2.1材料与方法

2.1.1培养基

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器

2.1.4样品的采集

2.1.5拮抗真菌的分离

2.1.6拮抗真菌的鉴定

2.2结果与分析

2.2.1根结线虫拮抗真菌分离结果

2.2.2根结线虫拮抗真菌的初步鉴定结果

2.2.3不同地区拮抗真菌的数量与分布

2.3 讨论

第三章根结线虫高效拮抗菌株的筛选

3.1材料与方法

3.1.1供试菌株

3.1.2供试线虫

3.1.3主要仪器及试剂

3.1.4根结线虫卵和二龄幼虫的获得

3.1.5非镰刀菌孢子悬浮液的制备及对根结线虫卵孵化的抑制率测定

3.1.6镰刀菌发酵粗提液的制备及其对二龄幼虫的毒杀活性测定

3.1.7 LGEM-5发酵粗提液热稳定性测定

3.2结果与分析

3.2.1非镰刀菌对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率

3.2.2镰刀菌发酵粗提液对根结线虫二龄幼虫的毒杀活性

3.2.3菌株LGEM-5发酵粗提液的热稳定性

3.3讨论

第四章高效拮抗菌株XPE-36和LGEM-5的鉴定

4.1材料与方法

4.1.1培养基

4.1.2主要仪器

4.1.3鉴定方法

4.2结果与分析

4.2.1 XPE-36的主要形态特征

4.2.2 LGEM-5的主要形态特征

4.3讨论

第五章结论

参考文献

致 谢

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