陕西省犊牛大肠杆菌性腹泻的流行病学调查及初步免疫试验

摘要

犊牛腹泻是1月龄以内的犊牛发生的一种以消化不良、腹泻为主要症状的消化道疾病，以4～10日龄为多发。病犊以体温升高、腹泻、脱水、自体中毒及心力衰竭为主要特征，是造成犊牛死亡的主要疾病之一。引起犊牛的腹泻有多种因素，在细菌性腹泻病中，由致病性大肠杆菌(Escherichia coli，E．coli)引起的腹泻占据首位，给养牛业带来了巨大的经济损失。大肠杆菌存在多种血清型，抗原复杂，肠毒素的毒力强弱不定，不同地区流行的血清型存在很大的差异。因此，调查当地犊牛大肠杆菌性腹泻的流行病学资料，鉴定出致病性大肠杆菌的毒力和优势血清型，再根据其研制有效的灭活疫苗，对该病的防治具有现实的生产意义。 本试验在2005年9月～2007年9月期间，对陕西省5个市区的12个养牛场和部分养殖户的犊牛腹泻进行流行病学调查，确定其主要病原菌为致病性大肠杆菌。调查结果表明，该地区普遍存在该病，每年都有较高的发病率(18.47％)和病死率(47.51％)；该病一年四季均有发生，但以12月至次年的4月份发病率最高(18.87％和21.26％)；主要发生于1月龄以内的犊牛，其中10同龄以内犊牛发病率(30.27％)和病死率(54.73％)最高。 分离菌株肠毒素检测结果表明，有23株能产生耐热肠毒素，21株能产生热敏肠毒素。大肠杆菌血清型鉴定试验结果显示，该地区主要有O2、O5、O9、O20、O55、O64、O75、O78、O86、O101、O138和O141 12种血清型，其中O2、O86、O101为优势血清型，优势血清型的大肠杆菌都有较强的毒力。在不同的发病地区流行的血清型有较大的差别，而且同一地区不同牛场或养殖户之间，甚至同一个牛场内也存在多个血清型，这就为进行犊牛大肠杆菌性腹泻的防治提供了病原学资料。 对致病菌的药敏试验结果表明，氟哌酸、庆大霉素、头孢哌酮、丁胺卡那及卡那霉素为高度敏感，氨苄西林、复合磺胺和红霉素分离菌株低敏，这与当地长期或大量使用该类药物，使致病菌已产生耐药性有关；单味中药金银花、野菊花等对分离出的大肠杆菌为高敏，以此为主药自行组方研制出“肠菌清散剂”对分离菌有明显的抑菌作用。用“肠菌清散剂”对典型腹泻病牛临床治疗试验结果表明总有效率为88.9％。 利用3株优势血清型的致病性大肠杆菌菌株，研制成大肠杆菌多价油乳剂灭活苗和氢氧化铝胶疫苗，经疫苗的无菌检验、安全性检验及抗体效价、保护力检测等试验，证明所研制的灭活苗具有较好的保护效果。

目录

文摘

英文文摘

声明

文献综述第一章犊牛大肠杆菌性腹泻研究进展

1.1病原学研究

1.1.1形态及染色特征

1.1.2培养特性

1.1.3生化特性

1.1.4抵抗力

1.1.5抗原特性

1.1.6 血清型

1.2流行病学

1.2.1易感性

1.2.2流行性

1.2.3传染源及传播途径

1.3发病机理

1.4 临床症状和病理变化

1.5诊断

1.5.1病原学诊断

1.5.2血清学诊断

1.5.3分子生物学方法

1.6 防治

1.6.1治疗

1.6.2一般性预防措施

1.6.3中草药防治

1.6.4疫苗免疫

试验研究第二章陕西省犊牛大肠杆菌性腹泻的流行病学调查与病原分离鉴定

2.1材料与方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2结果

2.2.1流行病学调查结果

2.2.2病原菌分离培养结果

2.2.3病原菌生化鉴定结果

2.2.4分离菌肠毒素检测结果

2.2.5清型鉴定结果

2.2.6毒力测定结果

2.2.7药敏试验结果

2.2.8肠菌清散剂临床治疗试验结果

2.3分析与讨论

2.3.1流行病学调查结果分析

2.3.2病原菌的鉴定

2.3.3抗生素药敏试验

2.3.4防治用中药的筛选和应用

试验研究第三章犊牛腹泻大肠杆菌自家灭活疫苗的制备及初步免疫试验

3.1材料与方法

3.1.1菌株

3.1.2佐剂

3.1.3实验动物

3.1.4培养基

3.1.5细菌培养

3.1.6细菌纯度检验

3.1.7细菌计数

3.1.8细菌浓缩

3.1.9细菌灭活

3.1.10细菌灭活检验

3.1.11三价油乳剂灭活疫苗的制备

3.1.12三价氢氧化铝胶灭活疫苗的制备

3.1.13疫苗的各项检验

3.2结果

3.2.1分离菌增殖结果

3.2.2细菌纯度检查结果

3.2.3细菌计数结果

3.2.4细菌灭活检验结果

3.2.5自制疫苗物理性状

3.2.6疫苗无菌检验结果

3.2.7安全性检验结果

3.2.8免疫效力检查结果

3.3分析与讨论

3.3.1大肠杆菌分离菌株的灭活苗研制

3.3.2细菌培养方式

3.3.3灭活方式

3.3.4安全性检查

3.3.5抗体效价检测

3.3.6保护力检查

3.3.7关于大肠杆菌病与其他疾病混合发生问题

结论

参考文献

致谢

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