肿瘤/睾丸抗原在乳腺癌组织中的表达与乳腺癌预后相关性的研究

摘要

肿瘤/睾丸抗原(cancer/testis antigen，CTA)是一类在正常组织中只局限性表达睾丸组织，但在肿瘤组织却大量异质性表达的肿瘤相关抗原。由于CTA与肿瘤的发生、发展密切相关,已经成为重要的肿瘤诊断及免疫治疗的靶分子。CTA已经发现了138个基因家族共编码204个转录子。CTA在蛋白水平上的研究远远滞后于基因水平上的研究，极大地制约了CTA在肿瘤诊断及治疗方面的应用。
　　本文利用重组人CT47蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾脏细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，共获得16株可分泌CT47特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株（FMU-CT47-1～FMU-CT47-16），并对单克隆抗体的亚类和腹水效价进行了鉴定。在此基础上用免疫组化的方法在睾丸组织芯片上筛选出特异性强、敏感性高的CT47 mAb FMU-CT47-5,应用此单抗对24种正常组织以及300例乳腺癌组织中CT47蛋白的表达进行系统检测。结果表明：CT47蛋白在正常组织中除表达在正常睾丸组织精原细胞的胞浆中外，还在正常胰腺导管上皮细胞和膀胱移行上皮细胞胞浆中呈颗粒状表达。CT47蛋白在正常乳腺组织中不表达而在乳腺癌组织中有明显表达，表达率为36.0％。CT47蛋白在乳腺癌中的表达与乳腺癌的分化、进展及预后相关,为乳腺癌诊断及治疗提供了重要的候选靶分子。
　　采用我室制备的CT10特异性单克隆抗体，运用免疫组化的方法对420例乳腺浸润性导管癌组织中CT10蛋白的表达进行较系统的研究。结果发现 CT10蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达率为27.1%，CT10蛋白定位于乳腺癌细胞的胞核中，跟据阳性细胞分布范围的不同可将CT10蛋白的表达分为点状表达、灶状表达及弥散性表达三种。运用免疫组化评分的方法，对CT10在乳腺癌组织上的表达量进行半定量评估，将CT10阳性表达的病人分为CT10高表达和CT10低表达两组并与临床相关病理参数进行相关性分析，结果发现CT10高表达与乳腺癌的淋巴结分级、远处转移、临床分期及诺丁汉预后指数相关。分析CT10高表达和低表达两组乳腺癌患者的无病生存期和总生存期发现 CT10高表达患者的无病生存期和总生存期都较CT10低表达患者低，提示CT10可促进乳腺癌的发展与乳腺癌的预后呈负相关。
　　综上所述，我们在乳腺癌组织上系统的分析了CT47、CT10两种CTA的表达规律，并且分析了其与乳腺癌预后的相关性，为两种CTA作为乳腺癌标志物以及与肿瘤发生发展关系的研究提供了重要的实验依据。

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前言

文献回顾

第一部分 乳腺癌标志物研究进展

1 肿瘤标志物的概念及分类

2 常用的乳腺癌标志物

第二部分 肿瘤/睾丸抗原研究进展

1 肿瘤/睾丸抗原的概念及特点

2 肿瘤睾丸抗原的鉴定方法

3 肿瘤/睾丸抗原的命名

4 肿瘤/睾丸抗原的分类及其表达特点

5 肿瘤/睾丸抗原的免疫原性

6 肿瘤/睾丸抗原的功能

7 肿瘤/睾丸抗原的临床应用

8 CT47及 CT10的研究进展

正文

第一部分CT47单克隆抗体的制备以及CT47在乳腺癌组织中的表达与乳腺癌预后相关性分析

1 材料

2 方法

3 结果

4 讨论

第二部分 CT10在乳腺癌上异质性表达及其与乳腺癌预后相关性分析

1材料

2方法

3 结果

4讨论

小结

参考文献

附 录

个人简历

论文发表情况

致谢