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内蒙地区苹果主栽品种组培再生体系的建立

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1引言

2试材与方法

3结果与分析

4不定芽发生的细胞组织学研究

5讨论

6结论

致谢

参考文献

附录

作者简介

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摘要

建立高效、稳定的再生体系是苹果转基因成功的关键环节,为此,本研究以苹果主栽品种黄太平、金红和沈农二号为试验材料,就影响其植株再生的有关因子,包括植物生长调节剂种类及浓度、暗培养时间、叶片极性、基本培养基、外植体类型、AgNO3及LH的影响等多方面进行研究探讨,建立了苹果高效离体再生体系。主要结果如下: 1离体叶片以MS为基本培养基,附加30mg/L蔗糖再生效果最好。金红、沈农二号试管苗叶片再生不定芽的最适培养基分别为,MS+TDZ2.0mg/L+NAA0.1mg/L,MS+3.0mg/LTDZ+0.1mg/LNAA;黄太平、金红田间叶片离体培养最适培养基分别为:MS+BA5.0mg/L+NAA0.05mg/L;MS+BA8.0mg/L+NhA0.05mg/L;再生苗叶片也可诱导形成不定芽,但再生率较低。 2叶盘接种后进行一段时间的暗培养(2-3周)可明显提高沈农二号叶片再生频率。 3叶片极性试验结果表明,叶片正面接触培养基再生率高,离体叶片基部再生效率最好。 4叶片、叶柄、茎段在培养条件相同情况下,叶片再生频率最高。 5培养基中附加AgNO3或LH对离体叶片再生没有促进作用,AgNO3可抑制愈伤的生长。 6试管苗生根培养基以1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.1mg/L效果最好。 7细胞组织学观察表明,叶片的组织脱分化始于维管束周围的维管束鞘细胞,不定芽的发生属于间接器官发生型。

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