氨溴索对罗红霉素在大鼠体内外药代动力学的影响

摘要

背景：罗红霉素(roxithromycin,RM)为临床上常用治疗由革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌引起的感染的抗生素；氨溴索(Amb)多用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急慢性肺部疾病,促进痰液排出,改善肺功能；Amb能增强RM对肺组织的穿透性,提高后者在感染部位的浓度,两者在临床上经常联合使用治疗支气管肺部细菌性感染。RM主要经肝脏代谢失活,有报道称Amb可能对肝药酶活性产生影响。经文献检索,未见Amb合用RM引起后者药代动力学参数改变的相关报道。本课题探讨Amb合用RM对后者药代动力学参数的影响,为临床合理用药提供依据。
　　 目的：研究Amb对RM在游离大鼠肝细胞温孵液及大鼠体内药代动力学参数的影响,评价药物间的相互作用及联合用药的合理性。
　　 方法：
　　 ①建立游离大鼠肝细胞的分离提取方法。通过光学显微镜、透射电镜检查、HE染色对肝细胞的产率、活力、细胞形态、超微结构等指标进行测定。
　　 ②建立游离大鼠肝细胞体外温孵体系。通过MTT方法测定不同浓度RM、Amb对游离大鼠肝细胞活力的影响。
　　 ③研究Amb对RM在游离大鼠肝细胞温孵液中代谢的影响:对照组单独在肝细胞温孵液中加入4μg·ml-1RM；实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在肝细胞温孵液中分别加入不同量的Amb,使Amb在各温孵液中浓度分别为2、4、8μg·ml-1,RM在温孵液中浓度均为4·μg·ml-1。各组均置于37℃的空气浴振荡器中振荡孵育60 min,样品处理后HPLC-UV检测法测定未代谢RM的含量,探明Amb对RM代谢的影响。
　　 ④Amb对RM药代动力学影响:72只SD大鼠随机分为4组,给药前禁食12h。对照组的大鼠单独予RM；实验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别预先予2.7mg·kg-1、5.4mg·kg-1、10.8mg·kg-1剂量的Amb,tidx6d,于第七天予Amb+RM。给药后经眼眶静脉丛采集血样,样品处理后采用反相HPLC-UV检测法测定RM的血药浓度,根据RM在体内经时过程,用DAS2.1.1统计软件求算该药单用及联合用药后的药动学参数。
　　 结果：
　　 ①建立了成熟的大鼠肝细胞分离方法和游离大鼠肝细胞温孵体系,肝细胞产率为1～2×108细胞/肝,肝细胞活力和纯度均在90％左右。
　　 ②RM的浓度在1～12μg·ml-1范围内,Amb的浓度在0.5～16μg·ml-1范围内,对游离大鼠肝细胞活力与空白对照组相比,未见显著影响,肝细胞活力>80％。
　　 ③RM的HPLC-UV检测方法为流动相:乙腈:水(含0.02mol·L-1磷酸二氢铵)=35:65,加三乙胺调pH值至7.1；流速:1ml·min-1；检测波长:210nm；AUFS:0.004。
　　 ④在游离大鼠肝细胞体外温孵液中,Amb对RM的代谢消除率的影响与对照组相比无明显区别(P>0.05)。
　　 ⑤大鼠在体实验表明:采用随机区组的方差分析进行统计学处理,实验组与对照组各组间RM的主要药动学参数Tmax、T1/2z、Cmax、Vz、CLz、AUC0～t、AUC0～∞均无显著性差异(P>0.05)。
　　 结论：本实验建立的游离大鼠肝细胞分离方法和游离大鼠肝细胞体外温孵系统稳定、可靠,能满足本实验药物代谢的要求。通过离体细胞实验和整体动物研究,Amb与RM联合使用时Amb对大鼠体内RM的药代动力学过程无明显影响,二者联合使用安全,为临床安全有效地使用Amb和RM提供了一定的实验依据。