人可溶性4-1BB配体在毕氏酵母中的高效表达及其生物学功能的研究

摘要

我们在国内率先采用基因工程技术克隆了编码人4-1BBL胞外段的cDNA,并在毕氏酵母GS115中进行表达,同时对获得的重组人可溶性4-1BBL蛋白潜在的生物学功能进行了系列探讨.4-1BBL由255个氨基酸组成,是Ⅱ型跨膜糖蛋白,有膜结合型和可溶性两种形式.膜型分子可被蛋白酶裂解以可溶性形式(soluble 4-1BB ligand,s4-1BBL)存在,而185个氨基酸组成的胞外段则构成了s4-1BBL.s4-1BBL作为一种新型共刺激分子在T细胞的活化、增殖、存活和对树突状细胞的体外诱导扩增及在肿瘤生物治疗方面的作用和价值则是该研究的重点;此外,成功构建了人4-1BB分子的转基因细胞,并通过此细胞对4-1BBL分子介导的反向信号传导亦做了初步的探讨,以期为4-1BBL和4-1BB分子在自身免疫和移植免疫中的作用提供理论依据.

目录

文摘

英文文摘

研究背景

14-1BB和4-1BB配体的生物学特性及其在机体免疫应答中的作用

2毕氏酵母（Pichia pastioris）表达系统

参考文献

第一部分人可溶性4-1BB配体在毕氏酵母中的高效表达及鉴定

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分重组人可溶性4-1BB配体功能的探讨

一、rhs4-1BB刺激T细胞特性的研究

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

二、rhs4-1BB体外对DC分化、成熟和功能的作用

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分4-1BBL和B7-1转基因骨髓瘤细胞对人T淋巴细胞的协同共刺激作用

第四部分4-1BB转基因细胞的构建及其功能探讨

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

小结

缩写词表

博士学习期间发表及待发表的论文

致谢