混合嵌合体在异种心脏移植产生免疫耐受作用中的实验研究

摘要

目的：通过非清髓方法建立豚鼠到大鼠混合嵌合体模型，进行豚鼠到大鼠腹部心脏移植，研究混合嵌合体的形成对受体内相关细胞因子表达水平的影响，探讨异种心脏移植免疫耐受机制。 方法：SD大鼠(受体)，雌性18只随机分为3组：所有受体大鼠接受60Coγ射线全身照射；并行环磷酰胺预处理，在照射后4小时内经尾静脉输注液体0．8ml。A组输注豚鼠骨髓细胞；B组输注豚鼠骨髓间充质干细胞；C组输注生理盐水。用ELISA法检测细胞移植后受体内IFN-γ和IL-4、IL．10细胞因子的表达，并行各组供受体的体外单向混合淋巴细胞培养(MLR)实验及嵌合体的测定。在成功建立嵌合体的基础上，利用静脉注射CVF干预超急性排斥反应(HAR)，行豚鼠到大鼠腹部异位心脏移植。在心脏移植后观察、记录各组移植心脏的存活时间和病理变化。 结果：A、B组动物接受60Coγ射线全身照射后行豚鼠BMC／BM-MSCs移植，经环磷酰胺预处理，在约21天后检测嵌合现象，A组嵌合率明显高于B组(P<0．05)。A、B两组中IFN-y、IL-4、IL-10细胞因子的表达水平一开始均较预处理前略有升高，但随后下降恢复至正常水平。MLR实验证明耐受大鼠的免疫应答反应降低。心脏移植后A组受体病理表现为超急性排斥反应，Acw组心脏存活时间为358±42分钟，较CcvF组(317±50分钟)和D组(174-5分钟)的存活时间显著延长(P<0．05)。 结论：(1)非清髓性方案预处理后行供体骨髓细胞(BMC)／骨髓来源的间充质干细胞(BM-MSCs)输注，可以建立混合嵌合体，成功诱导免疫耐受。(2)诱导建立的嵌合体无法排除豚鼠到大鼠的超急性排斥反应。(3)通过应用CVF，排除超急性排斥反应的情况下，混合嵌合体能够使得豚鼠到大鼠异种心脏移植的供心存活时间延长。

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材料和方法

结果

讨论

结论

参考文献

嵌合体在移植免疫耐受研究中的进展

附图

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