石刁柏花药显微结构观察及花药培养研究

摘要

本实验以石刁柏花蕾为材料，采用石蜡切片法制片，观察了石刁柏花药的解剖结构，比较分析了石刁柏花蕾外部形态特征以及石蜡切片观察，得出二者之间对应关系；以石刁柏花药为材料，通过花药培养筛选出适合石刁柏花药培养的诱导培养基、分化培养基及培养条件并获得花粉植株；以石刁柏再生植株和栽培植株为材料，采用过氧化物酶同工酶电泳方法进行了鉴别再生植株性别的尝试，其结果表明： 1．石刁柏花药的横切面呈蝴蝶形状，由药隔、花粉囊构成。花粉囊包括花粉粒、花药壁二部分。花药壁初期常贮藏大量物质。花药成熟时，细胞径向扩展，贮藏物质消失，除外切向壁外，均发生多条斜纵向条纹状的纤维素次生加厚。花粉囊中的绒毡层的细胞较大，初期为单核的但在花粉母细胞开始减数分裂时，形成双核或多核。花粉囊壁因绒毡层的解体而消失，或仅存痕迹，只剩有表皮及纤维层。 2．得出了不同发育时期石刁柏花蕾的外部形态特征与花药内部的细胞学特征之间的对应关系：花蕾长度为1.5～2mm时，花药中的花粉处于单核靠边期。 3．适合石刁柏花药培养的诱导培养基是以MS为基本培养基附加1.0 mg/L6-BA配合2.0 mg/LNAA，诱导率为56.0％。分化培养基是以MS为基本培养基附加6-BA1.0 mg/L、NAA0.2 mg/L，最高分化率为60％。 4．蔗糖适合作为石刁柏花药培养中的碳源，其适宜浓度是3％。培养基中适当加入活性炭，有利于愈伤组织的诱导和分化，其适宜的浓度为：0.5％。 5．石刁柏花药培养中，适合发根的方法是直接取0.3cm的茎尖接种到6-BA、NAA、IBA、和KT配合使用的培养基中，且适宜石刁柏再生苗发根的培养基是：MS+6-BA 0.05 mg/L+NAA 0.04 mg/L+IBAlmg/L+KT 0.4mg/L。 6．石刁柏雌雄株过氧化物酶同工酶电泳的结果显示，雄株比雌株少一条酶带，表明通过过氧化物酶同工酶电泳酶谱分析，可以早期鉴别出石刁柏花药培养再生植株的性别。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章前言

1.1石刁柏概述

1.2石刁柏的生物学特性

1.3石刁柏的利用价值

1.4植物组织培养技术及单倍体的离体培养

1.5植物花药培养

1.6同工酶技术在植物性别鉴定上应用

1.7本研究目的和意义

第二章材料与方法

2.1不同发育时期石刁柏花药石蜡切片

2.1.1实验材料

2.1.2试验方法

2.2石刁柏花药培养

2.2.1实验流程

2.2.2愈伤组织诱导及分化培养基的筛选

2.2.3碳源及其浓度对愈伤组织诱导率的影响

2.2.4活性炭的浓度对愈伤组织诱导和分化的影响

2.2.5低温预处理对花药的影响

2.2.6不同生长调节物质水平对生根的影响

2.2.7再生植株的获得

2.2.8再生植株根尖染色体鉴定

2.3石刁柏栽培植株和再生植株的过氧化物酶同工酶电泳

2.3.1实验材料

2.3.2实验方法

第三章结果与分析

3.1石刁柏花药发育过程的研究

3.2石刁柏花药培养研究

3.2.1石刁柏花蕾的消毒

3.2.2愈伤组织诱导及分化培养基的筛选

3.2.3碳源及其浓度对愈伤组织诱导率的影响

3.2.4活性炭的浓度对愈伤组织诱导和分化的影响

3.2.5低温处理对花药诱导率的影响

3.2.6不同植物激素对石刁柏再生植株生根的影响

3.2.7再生植株的染色体鉴定

3.2.8再生植株的移栽

3.3石刁柏栽培植株和再生植株过氧化物酶电泳分析

第四章讨论与结论

4.1讨论

4.2结论

参考文献

致谢词