泛素与细胞周期蛋白B1在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义

摘要

背景和目的：
　　卵巢上皮性恶性肿瘤是女性生殖系统常见三大恶性肿瘤之一,早期常无特异性临床症状,患者就诊时已多属晚期,死亡率居妇科恶性肿瘤首位,5年生存率徘徊在30％~40％。CA125是唯一确认诊断的辅助敏感指标,且80％的上皮性卵巢癌患者血清中可检测到CA125水平升高,但其水平高低在临床上仅用于监测卵巢癌患者治疗中的病情缓解及恶化情况,目前仍缺乏相对较特异的生物学标记物用于其早期诊断及预后判断。
　　因此,寻找有关卵巢癌早期诊断、病情监测、预后判断的新指标,提高卵巢癌患者生存率,是目前卵巢癌研究中至关重要的课题。泛素(Ubiquitin,Ub)及其依赖的非溶酶体途径在肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用,它是存在于所有真核组织细胞中的高度保守的多肽,以自由分子或泛素结合蛋白(或蛋白泛素化)的形式存在。泛素广泛分布在各种组织,是参与异常蛋白翻译后修饰的一种组分,其主要作用是参与蛋白质的降解。
　　在有功能的泛素链接酶系统-特异性ATP依赖性酶的催化下,各种细胞蛋白被泛素化修饰,进而在溶酶体和非溶酶体两大系统参与下,泛素化的细胞蛋白被降解。若泛素-蛋白酶体途径发生障碍,将影响细胞周期调控,除了加强一些癌基因的作用外,还可以使一些抑癌基因的作用减弱,进而促使肿瘤发生。因此,细胞蛋白的泛素修饰对于许多细胞活动过程是至关重要的,包括细胞内蛋白的选择性降解和细胞对各种有害刺激的应激反应及对细胞损伤的保护反应。
　　然而,Ub在卵巢癌中是否存在异常表达,其表达的改变能否影响卵巢癌的发生、发展及预后尚不十分清楚。肿瘤的发生、发展和恶变与细胞周期的失控密切相关。细胞周期蛋白B1(CyclinB1)是一个经典的分裂周期蛋白,参与细胞周期检查点调控,促进G2/M期转换而加速细胞周期进程。
　　迄今为止,哺乳动物细胞中发现B型细胞周期素有6个亚型,称为CyclinB1~6,CyclinB1主要出现在S期并在此期开始表达,在G2/M时达到峰值,然后迅速被泛素化降解(Ubation),其过表达使细胞周期G2/M转换时间缩短,从而导致细胞癌变。
　　本研究通过免疫组化SP法检测Ub和CyclinB1蛋白在卵巢上皮性癌中的表达情况,探讨其表达与卵巢上皮性癌临床病理因素、预后的关系,为卵巢癌的临床诊断、病情监测、预后判断和治疗等方面提供科学的实验数据和理论依据。
　　材料和方法：
　　1.收集我院2004年1月~2007年12月妇科住院患者手术切除的卵巢上皮性肿瘤石蜡包埋组织标本70例及正常卵巢组织标本20例,所有标本术前均未行放疗、化疗及其他治疗。其中卵巢上皮性恶性肿瘤组织标本50例,包括浆液性囊腺癌36例、粘液性囊腺癌9例、子宫内膜样癌5例;卵巢良性肿瘤组织标本20例,包括浆液性囊腺瘤16例、粘液性囊腺瘤4例。
　　2.采用免疫组化SP法检测20例正常卵巢组织、20例上皮性良性卵巢肿瘤组织及50例上皮性卵巢癌组织中Ub和CyclinB1的表达情况,结合上皮性卵巢癌的组织学类型、病理分级、临床分期及淋巴结转移情况进行分析,并研究两指标间的相关性。
　　3.统计学处理:采用SPSS13.0统计软件包进行数据分析,Ub和CyclinB1蛋白的表达及其与临床病理学特征的关系采用x2检验,Fisher精确概率法,采用Spearman等级相关分析二者的相关性。以α=0.05作为检验水准。
　　结果：
　　1.Ub蛋白在上皮性卵巢癌、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中的阳性表达率分别为34％(17/50)、10％(2/20)、5％(1/20),CyclinB1的阳性表达率分别为42％(21/50)、15％(3/20)、5％(1/20),两者在卵巢癌中的阳性表达率均显著高于正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。
　　2.卵巢上皮性癌中,Ub的表达与组织学分级、临床分期、淋巴结转移相关(P<0.05);与组织学类型无明显相关性(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中Ub蛋白阳性表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期,差异有统计学意义(x2=4.529,P<0.05);G3级卵巢癌组织中Ub蛋白阳性表达率显著高于G1、G2级,差异有统计学意义(x2=3.964,P<0.05);淋巴结转移组织中Ub蛋白阳性表达率显著高于无淋巴结转移的组织,差异有统计学意义(x2=6.269,P<0.05)。
　　3.在卵巢上皮性癌组织中,CyclinB1的表达与组织学分级、临床分期、有无淋巴结转移相关(P<0.05);与组织学类型无明显相关性(P>0.05)。Ⅲ、Ⅳ期卵巢癌组织中CyclinB1蛋白阳性表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期,差异有统计学意义(x2=5.520,P<0.05);G3级卵巢癌组织中CyclinB1蛋白阳性表达率显著高于G1、G2级,差异有统计学意义(x2=4.217,P<0.05);淋巴结转移组织中CyclinB1蛋白阳性表达率显著高于无淋巴结转移的组织,差异有统计学意义(x2=6.226,P<0.05)。
　　4.卵巢癌组织中Ub和CyclinB1蛋白表达的相关性:50例卵巢癌组织中Ub蛋白和CyclinB1蛋白均为阳性表达者7例,均为阴性表达者19例,Ub蛋白阳性表达而CyclinB1蛋白阴性表达者为10例,Ub蛋白阴性表达而CyclinB1阳性表达者为14例,结果表明两者的表达水平呈现高度的一致性,经Spearman等级相关分析,相关系数r=0.301,P=0.033,表明Ub和CyclinB1蛋白在卵巢癌组织中的表达呈正相关关系。
　　结论：
　　1.从正常卵巢组织、良性卵巢上皮肿瘤组织到卵巢上皮性癌组织,Ub和CyclinB1蛋白的阳性表达率逐渐升高,且多表达在临床分期较晚、组织学分级较差、有淋巴结转移的卵巢癌中,提示两者的高表达可能促进卵巢癌的发生、发展、浸润和转移。
　　2.在卵巢癌组织中,随着CyclinB1蛋白表达的增高,Ub蛋白的表达增高,且Ub和CyclinB1在卵巢上皮性癌组织中的表达呈正相关关系,提示两者在卵巢癌的发展过程中可能存在协同作用。
　　3.检测Ub和CyclinB1蛋白表达水平可能对卵巢上皮性癌的恶性程度判断有重要意义。

目录

摘要

Abstract

论文部分 泛素与细胞周期蛋白B1在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义

引言

材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述部分 泛素和细胞周期蛋白B1与妇科肿瘤的关系研究进展

正文

参考文献

附录部分

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