精子鞭毛相关蛋白在人精子中的表达特征及其临床意义

摘要

精子从附睾中射出后需要经过一段距离的运动才能与卵细胞相遇而受精，因此，精子活力对于正常受精是十分必要的。弱精子症或精子活动力低下是导致男性不育的主要原因之一。导致精子活力低下的原因很多，包括精子尾部结构的异常和功能的缺失。因此，通过对正常精子鞭毛功能和精子活动力的分子机制的理解，可以为弱精子症提供一条可行性的治疗途径。Ropporin为一种精子鞭毛相关蛋白，高表达于睾丸组织中，并特异性的定位于精子鞭毛的主段和尾段上，在细胞粘连、胞质分裂和细胞运动方面有着重要的作用。同时，Ropporin是鸟苷三磷酸酶（GTPase）Rho结合蛋白和Rhophilin的精子特异性结合蛋白。在体外，Ropporin、Rhophilin和GTP-Rho可形成一种三元络合物，通过Rho信号通路调控精子运动。作为一种AKAP结合蛋白，该蛋白还可与AKAPs相互结合，参与精子运动。ODF1作为外周致密纤维（ODFs）家族成员之一，为精子尾部重要的组成部分，它包绕着轴丝，由9根纵行的柱状结构组成，每一根致密纤维与其相对的轴丝二联微管平行，其外面被纤维鞘包裹着，主要定位于精子尾部的中段和主段，在精子的形态结构和活动力方面发挥着重要的作用。
　　 本研究采用RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测了Ropporin和ODF1 mRNA在正常生育男性和弱精子症患者精液精子中的表达差异，发现Ropporin和ODF1在弱精子症患者精子中的表达明显下降。另外，免疫细胞化学方法检测到Ropporin特异性地定位于精子鞭毛的主段和尾段上，与正常生育男性精子相比，Ropporin蛋白在弱精子症患者精子中的表达明显下降。Western-Blot 结果显示Ropporin和ODF1蛋白在正常人精液精子中的表达量均高于弱精子症患者精液精子。本研究证实了Ropporin和ODF1在人精液精子中的表达情况，并且，与正常生育男性精液精子相比，Ropporin和ODF1在弱精子症患者精液精子中的表达显著下降。Ropporin和ODF1的表达降低可能是导致精子活动力低下的原因之一。