GM-CSF基因修饰、肺腺癌细胞mRNA负载的树突细胞瘤苗抗肺癌免疫的实验研究

摘要

目的：分离培养人外周血树突细胞(dendriticcell，DC)，并利用人巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophagecolony．stimulatingfactor，GM-CSF)基因及人肺腺癌细胞系SPC-A1mRNA共同修饰树突细胞，探讨修饰后的人外周血树突细胞疫苗在体内外诱导特异性抗肿瘤免疫反应的能力。 方法：采用体外扩增、转录的方法获得人肺腺癌细胞系SPC-AImRNA，并利用脂质体转染的方法将GM-CSF基因、SPC-AImRNA导入DC，流式检测转染后DC表面标记，并与T淋巴细胞共孵育，通过体外MTT法检测其在体外对人肺腺癌细胞的特异性杀伤活性及体内对裸鼠人肺腺癌细胞移植瘤模型的治疗作用，来探讨其体内外诱导抗肿瘤免疫反应的能力。 结果：1.成功获得特异性表面标志及功能相关分子表达相对增高的成熟人外周血树突细胞(P<0．01)； 2．经该树突细胞诱导后的T淋巴细胞体内外特异性杀伤活性与对照组相比显著增强(P<0．01)。 结论：1.GM-CSF基因及肿瘤抗原mRNA负载树突细胞，能显著增强树突细胞的抗肿瘤反应的特异性，增强免疫应答的强度。预示着利用该方法来制备DC瘤苗的可行性： 2．通过体外扩增获得肿瘤抗原mRNA的方法，解决了DC瘤苗在临床上因肿瘤抗原的来源问题而受到广泛应用的限制及其诱导的肿瘤免疫反应的特异性问题，为肿瘤的治疗开辟一条新的治疗策略，为提高肿瘤患者长期生存率及生存质量奠定实验基础。

目录

前 言

附：实验设计流程图

材 料

方 法

结 果

讨 论

结 论

参考文献

致谢

以树突细胞为基础的肺癌基因免疫治疗