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芪蓝颗粒制剂对大鼠实验性口腔癌前损害和癌免疫功能影响的研究

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引言

第一部分动物模型制备及淋巴细胞亚群检测

1.材料和方法

2.实验结果

3.讨论

第三部分细胞因子检测

1.材料和方法

2.实验结果

3.讨论

结论

参考文献

综述 CD4+,CD25+ 调节性T细胞对NK细胞调节作用的研究进展

致谢

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摘要

目的:用4nqo诱导SD大鼠口腔粘膜癌变,以芪蓝颗粒干预其癌变发生发展,观察大鼠主要免疫指标变化情况,探讨癌变过程中免疫系统的变化及芪蓝颗粒的作用机制。 方法:选用SD大鼠150只,随机分为癌变模型组(A组),低剂量中药干预组(B组),中剂量中药干预组(C组),高剂量中药干预组(D组)以及正常对照组(E组),分别给予0.002%4nqo及0.002%4nqo加高、中、低三种剂量的“芪蓝颗粒”,建立大鼠的癌变模型及药物干预模型。于9w、18w、27w、36w分批处死动物,取舌组织做病理切片,诊断结果作为免疫指标的影响因素代入统计;取新鲜全血,流式细胞术检测各样本全血中CD3+细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比,CD4/CD8比值,NK细胞百分比;取上述各样本全血制备血清,ELISA法检测血清IL-2,IL-10,TNF-α。采用多元方差分析或多因素方差分析检验各影响因素对观察值的影响,并对有意义的项目分组间两两比较。 结果:1.芪蓝颗粒抑癌阻癌实验结果:总体癌变率B、C、D组显著低于A组(p均<0.05),而且癌变时间往后推迟了9w左右;A组第36w100%样本发生癌变,芪蓝颗粒干预的B、C、D组,其第36w癌变率均显著低于A组(P<0.05),其中以C组的效果最为明显。2.大鼠癌变模型的免疫研究显示:不同病理病变程度分级间CD3+细胞百分比,CD4+T细胞百分比,CD4/CD8比值,血清IL-2,IL-10浓度有显著差别(p<0.01);CD3+细胞百分比、CD4+T细胞百分比:无病理变化组>异常增生组>鳞状细胞癌组:鳞癌样本的CD4/CD8值较异常增生样本和无病理变化样本显著下降(p<0.01);恶液质体征的样本NK细胞百分比明显低于其它样本(p<0.01);血清中IL-2浓度:无病理变化组>异常增生组>鳞状细胞癌组,IL-10浓度:无病理变化组<异常增生组<鳞状细胞癌组。3.药物干预的免疫研究显示:分组间CD3+细胞百分比,CD4+T细胞百分比,血清IL-10浓度也有差别(p<0.05),CD3+细胞、CD4+T细胞百分比E组>C组>A组;血清IL-10浓度,B组和C组低于A组(p<0.01)。4.CD8+T细胞、血清TNF-α浓度在各组间无显著差别。 结论:1.芪蓝颗粒有阻癌抑癌作用。2.芪蓝颗粒能降低致癌剂对机体免疫系统的破坏作用,相对稳定T细胞水平,而主要是稳定CD4+辅助性T细胞的水平。提高机体免疫识别和反应能力,进而增强了机体的防癌能力。3.芪蓝颗粒能抑制IL-10的分泌水平,削弱了癌变中机体的免疫抑制机制,从而增强了机体的抑癌能力。4.实验所选干预剂量中,中剂量用药对免疫系统的作用效果优于低剂量和高剂量用药,与癌变率的结果一致。

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