不同透析膜对终末期肾病血液透析患者外周血T淋巴细胞凋亡的影响

摘要

目的研究终末期肾病(ESRD)患者外周血T淋巴细胞凋亡，AnnexinV、Bcl-2、Fas的表达，Th1／Th2类细胞因子分化特征及以及不同透析膜对维持性血液透析患者T淋巴细胞凋亡的影响。 方法应用原位末端标记(Tunel)、流式细胞术等方法检测10例ESRD未透析(ND)患者，45例维持性血液透析患者分别采用醋酸纤维素膜(CA)(13例)、低通聚砜膜(PS-LF)(16例)、高通聚砜膜(PS-HF)(16例)，以及8例健康对照(C)组的外周血T淋巴细胞经植物血球凝集素(PHA)刺激培养24小时后T淋巴细胞的凋亡指数、AnnexinV的表达，免疫组化检测T淋巴细胞Bcl-2、Fas的表达，ELISA方法检测T淋巴细胞培养上清IFN-7、IL-4的水平，放免法检测血清p2微球蛋白。 结果ESRD各组外周血淋巴细胞计数低于健康对照组，未透析组低于各透析组；维持性血液透析各组外周血淋巴细胞计数以高通聚砜膜组最高，低通聚砜膜组次之，醋酸纤维素膜组最低，组间比较差异有显著性，p<0．05。ESRD各组血清p2微球蛋白明显高于健康对照组，未透析组高于各透析组，p<0．05；维持性血液透析各组以醋酸纤维素膜组最高，低通聚砜膜组次之，高通聚砜膜组最低，高通与低通聚砜膜组、醋酸纤维素膜组比较差异有显著性，p<0．05，但低通聚砜膜组与纤维素膜组组间比较差异无显著性，p>0．05。ESRD各组外周血T淋巴细胞AnnexinV的表达高于健康对照组，未透析组高于各透析组，维持性血液透析各组T淋巴细胞AnnexinV的表达以高通聚砜膜组最低，低通聚砜膜组次之，醋酸纤维素膜组最高，组间比较差异有显著性，p<0．05；原位末端标记(Tunel)法显示各组T淋巴细胞凋亡指数变化趋势同AnnexinV的表达。ESRD各组外周血T淋巴细胞Bcl-2的表达低于健康对照组，未透析组低于各透析组，组间比较差异有显著性，p<0．05；维持性血液透析各组T淋巴细胞Bcl-2的表达以高通聚砜膜组最高，低通聚砜膜组次之，醋酸纤维素膜组最低，组问比较差异有显著性，p<0．05；ESRD各组外周血T淋巴细胞Fas的表达高于健康对照组，未透析组高于各透析组，组间比较差异有显著性，p<0．05，维持性血液透析各组T淋巴细胞Fas的表达以醋酸纤维素膜组最高，低通聚砜膜组次之，高通聚砜膜组最低，组间比较差异有显著性，p<0．05。相关分析显示AnnexinV与Fas呈直线正相关，相关系数r=0．81664(p<0．01)，与Bcl-2呈直线负相关，相关系数r=-0．83306(p<0．01)。ESRD各组T淋巴细胞培养上清中IL-4的水平高于健康对照组，IFN-7低于健康对照组；维持性血液透析各组IL-4的水平以醋酸纤维素膜组最低、低通聚砜膜组次之，高通聚砜膜组最高，但组问比较差异无显著性，p>0．05；维挣发性血液透析各组IFN-7水平以高通聚砜膜组最高，低通聚砜膜组次之，醋酸纤维素膜组最低，组间比较差有显著性，p<0．05。相关分析显示IL-4与AnnexinV呈直线正相关，相关系数r=0．54859(p<0．01)，IFN-7与AnnexinV呈负相关，相关系数r=-0．74895(p<0．01)，血清p2微球蛋白与IFN-7呈负相关，相关系数r=-0．55839(p<0．01)。 结论①ESRD患者外周血T淋巴细胞的凋亡加速，Bcl-2、Fas参予T淋巴细胞凋亡的发生；②ESRD患者外周血Th类细胞因子失衡，呈Thl细胞因子分泌低下，Th2细胞因子优势；③Th类细胞因子参予T淋巴细胞凋亡的调控，即IFN—Y水平增高可抑制T淋巴细胞凋亡的发生；④维持性血液透析患者的T淋巴细胞凋亡不仅与透析膜的生物相容性有关还与透析膜的通透性有关。

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