非小细胞肺癌3P基因多区域杂合性缺失联合检测的研究

摘要

研究背景：肺癌是当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一，肺癌的发病率和死亡率居恶性肿瘤的首位，其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)病例占全部肺癌病例的80％。肺癌患者的远期治疗效果仍不尽人意，即使Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者，术后5年生存率也只有40％-70％。在被确诊的肺癌患者中，仅有20％的患者处于疾病早期，而80％的患者病情已发展到中晚期，并且常出现肿瘤早期发生微转移。因此利用分子生物学的方法在最小创伤的前提下进行肺癌的诊断和微转移的检测具有重要意义。荧光定量PCR(fluorescence quantification PCR)技术，是一种新的核酸定量技术，其基本原理就是在。PCR的基础上加入荧光标记探针，巧妙地把核酸扩增(PCR)、杂交、光谱分析和实时检测技术结合在一起，借助于扩增过程中产生的荧光信号来检测PCR产物，从而提高了检测的特异性并且在保持高敏感性的前提下尽量减少假阳性的干扰。 目的：探讨人3号染色体短臂(3P)等位基因位点杂合性缺失(LOH)在人非小细胞肺癌(NSCILC)临床检测中的意义。 方法：分别对32例非小细胞肺癌肿瘤组织标本和8例肺非恶性肿瘤组织标本以及两组外周血有核细胞标本进行3p染色体3个位点LOH检测，其中鳞癌13例、腺癌12例、腺鳞癌4例，大细胞癌3例，对照组均为经病理证实的肺非恶性肿瘤组织。检测方法：采用实时荧光定量PCR方法，PCR产物经8％的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染，经凝胶成像系统(Alpha Innotech)的密度分析功能判断结果并对试验结果进行非参数检验。 结果：32例肺癌标本中LOH联合检出率为78.125％，外周血有核细胞LOH联合检出率为65.625％，其中肺癌组织标本各位点的LOH检出率分别为43.75％(3p25)、56.25％(3p14)、56.25％(3p21.3)，外周血有核细胞各位点检出率分别为18.75％、31.25％、50％，相比对照组结果具有显著差异。组织及外周血有核细胞联合检出率高于各区域单纯检出率，差别具有统计学意义。同一患者的肺癌肿瘤组织与外周血有核细胞3P基因LOH联合检测结果存在一致性。 结论：肺癌组织及外周血有核细胞3p基因LOH检测对于肺癌的无创诊断有重要意义，且多区域联合检测有助于提高检测的敏感性。肿瘤组织与外周血有核细胞3P基因LoH联合检测存在一致性对于检测肿瘤微转移有一定意义。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

1.引言

2.材料与方法

3.结果：

4.讨论：

5.结论

参考文献

附录

致谢

综述 肺癌染色体微卫星异常的研究