运动与中药淫羊藿对骨质疏松大鼠骨髓组织细胞间黏附分子表达的影响

摘要

目的：通过观察运动、中药淫羊藿及其联合作用对去势大鼠松质骨细胞间黏附分子——纤维连接蛋白(FN)、CD44、细胞间黏附分子-1(ICAM-1或CD54)表达的变化，从分子水平探讨运动及中药淫羊藿防治绝经后骨质疏松中细胞间黏附分子变化及机制。为寻找新的骨质疏松防治药物和方法提供参考。 方法：34只三月龄雌性Wistar大鼠随机分为4组：去势对照组(OVX组)10只、灌药组(M组)8只、运动+灌药组(SM组)8只、运动组(S组)8只。OVX组去势后不采取任何干预措施，分别于去势后4周、6周、8周、10周、12周随机处死两只，取双侧膝关节；去势一周后M组进行淫羊藿水提取液灌胃治疗，S组于去势一周后进行递增负荷游泳训练，SM组于去势一周后同时进行淫羊藿水提取液灌胃和递增负荷游泳训练。所有大鼠于去势十二周后处死，取双侧膝关节。取材采用石蜡包埋，制备石蜡切片，免疫组织化学方法检测FN、CD44、CD54表达情况；Image-Pro Plus 6.0图像处理软件测定各黏附分子阳性表达的积分光密度值(IOD)；SPSS15.0统计处理。 结果：1.大鼠去势后出现大量多核巨噬细胞／破骨样细胞，且均强表达FN。与去势十二周组相比，三个干预组FN表达均下降，但无显著性差异(P>0.05)。 2.去势四周后大鼠骨组织多核破骨样细胞中均见有CD44表达，且表达量呈上升趋势。与对照组(去势12周)相比，S组、M组、SM组中CD44表达量均下降，且具有显著性差异(P<0.05)。 3.对照组(去势十二周组)、S组和M组中CD54多表达在多核破骨样细胞胞质和胞膜上。与对照组相比，S组和M组中CD54表达量明显下降，具有显著差异(P<0.05)。而SM组CD54多表达于胞核较少的巨细胞胞质和胞膜上，细胞核不明显；多核破骨样细胞中呈阴性或弱阳性表达。 结论：1.运动一方面可能通过对骨产生的剪切应力和流动电压，作用于破骨细胞，下调其表面CD44和CD54的表达，进而影响了多核破骨样细胞的融合及其破骨活动，起到防治骨质疏松的作用；另一方面运动可能通过上调体内与骨代谢相关激素的浓度，进而使骨组织细胞间黏附分子CD44、CD54的表达下降，影响了破骨样细胞＼破骨细胞的黏附、融合，使骨吸收下降，起到防治骨质疏松的作用。 2.中药淫羊藿通过其有效成分——淫羊藿总黄酮，与成骨细胞、破骨细胞表面雌激素受体结合，发挥类雌激素作用，下调多核破骨样细胞＼破骨细胞上CD44和CD54的表达，进而影响了多核破骨样细胞的融合及其破骨活动，起到防治骨质疏松的作用。 3.运动与淫羊藿联合作用阻断了成骨细胞与破骨细胞前体间CD54的信号转导，使破骨细胞分化成熟的刺激信号减少，进而影响了破骨样细胞的分化成熟，从而使破骨细胞数量减少，起到防治骨质疏松的作用。

目录

文摘

英文文摘

声明

1.前言

2.文献综述

2.1骨质疏松的运动与中药(淫羊藿)疗法研究现状

2.1.1骨质疏松运动疗法现状

2.1.2骨质疏松的中药(淫羊藿)治疗现状

2.2细胞间黏附分子CD44、CD54、FN研究综述

2.2.1 CD44研究现状

2.2.2 CD54研究现状

2.2.3 FN研究现状

3.实验材料与方法

3.1实验动物及分组

3.2主要实验仪器与试剂

3.3动物模型的建立

3.3.1骨质疏松模型的建立

3.3.2运动模型的建立

3.3.3药物的制备与干预

3.4取材及样品制备

3.5切片制备及免疫组化

3.6图像采集及数据分析

4.实验结果

4.1实验各组FN表达情况

4.2实验各组CD44表达情况

4.3实验各组CD54表达情况

5.分析与讨论

5.1去势后大鼠松质骨FN、CD44、CD54表达变化的意义

5.2运动对去势大鼠松质骨FN、CD44、CD54表达的影响

5.3中药淫羊藿对趋势大鼠松质骨FN、CD44、CD54表达的影响

5.4运动联合中药淫羊藿对大鼠松质骨FN、CD44、CD54表达的影响

6.结论

致谢

参考文献