Graves病患者T细胞亚群与其表面共刺激分子CD28/CTLA-4表达及相关研究

摘要

【目的】 了解Graves病(GD)患者T细胞亚群及其表面共刺激分子CTLA-4(CD152)、CD28的表达水平变化，探讨其与TSH受体抗体(TRAb)产生可能的相关关系，以及在GD病免疫病理紊乱发生过程中的作用及意义，为临床提供新的研究思路和免疫治疗途径。 【方法】 1．收集入组研究对象并随机分组为：初诊 GD 组(n=52)、GD 治疗缓解组(n=39)、无毒性甲状腺腺瘤组(Nontoxic nodular goiter，NTNG，n=42)和正常对照组(n=46)。于清晨7:30～9:00空腹抽取各组试验对象外周静脉血 8ml，取 4ml用聚蔗糖—泛影葡胺分层液密度梯度离心法(Ficoll)制备外周血单个核细胞悬液。 2．取外周血单个核细胞悬液 100μl 分别加入已有不同特异性单抗(30μl)的Eppendorf管于室温避光孵育20 min，经洗涤两次再加入 0.5 ml PBS 液重悬，采用免疫荧光技术、三色标记的流式细胞术检测T细胞亚群及其表面共刺激分子CTLA-4(CD152)、CD28 的表达比率。其余全血标本用以甲状腺功能及TRAb检测：s-TSH、FT3、FT4采用自动化学发光法测定；TRAb采用放射受体分析法(RRA)。 【结果】 1．初诊GD组外周血CD4<'+>T细胞、CD4<'+>/CD8<'+>比值、TRAb 表达水平较正常对照组及NTNG组增加，有统计学意义(分别为 p<0.01，p<0.05，p<0.01)；而CD8<'+>T细胞数量减少，差异有统计学意义(p<0.05)。经甲巯咪唑治疗后GD缓解组，CD4<'+>T细胞比率、CD4<'+>/CD8<'+>比值、T细胞表面CTLA-4(CD152)表达水平及血清中促甲状腺素受体抗体(TRAb)的表达水平均较初诊组明显下降，差异有统计学意义(分别为 p<0.01，p<0.05，p<0.01)，NTNG 组与正常对照组比较CD4<'+>T细胞数量、CD4<'+>/CD8<'+>比值无明显变化，而CD8<'+>T细胞数量有所减少，但差异无统计学意义。 2．初诊GD组T细胞表面共刺激分子CTLA-4(CD152)表达率较正常对照组及 NTNG组显著增加，其中以 CD4<'+>/CD152<'+>T细胞增加最为明显，差异有统计学意义(p<0.01)；共刺激分子CD28分子表达量较正常对照组及NTNG组增加，差异有统计学意义(p<0.05)；尤其以CD8<'+>/CD28<'+>T细胞增加最为明显，差异有统计学意义(p<0.01)。 【结论】 1．GD患者外周血CD4<'+>T细胞的高表达及CD4<'+>/CD8比值失衡在免疫异常的调节中发挥重要作用，其机理可能为CD4过度的强烈应答产生大量IL-2、INF-Y、IL-10 等细胞因子并刺激B细胞产生过量自身抗体等，导致免疫应答向自身反应方向偏移，引起免疫调节异常反应。 2．T细胞表面共刺激分子CD28、CTIA-4(CD152)分子表达量的失衡可能是影响多种细胞因子、甲状腺自身抗体产生及T细胞活化、增殖或凋亡的重要因素，从而参与GD发生、发展及演变过程。

目录

声明

1.前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

2.材料与方法

2.1研究对象

2.2仪器与试剂

2.3标本的采集与处理

2.4统计学方法

3.结果

4.讨论

5.全文小结

论文参考文献

协同刺激分子在Graves病发病机制中的研究进展

致谢

附录