人胎儿肺上皮细胞的发育分化及其干细胞的初步鉴定

摘要

因此该研究拟通过观察人胎儿肺发育过程中上皮细胞发育分化的形态特征和特异性蛋白的表达,进一步阐明肺上皮细胞发育分化的规律及其调节因素,在形态和功能上对发育过程中的肺上皮干细胞进行鉴定,初步明确可作为鉴定肺干细胞的标志物及方法,同时阐明其存在的壁龛和分布特征,为后续的研究工作打下基础.结论一,胎肺发育19周时,在形态上即可辨认AECⅠ、AECⅡ和气血屏障结构,说明此时AECⅠ和AECⅡ开始分化,是胎肺具有换气功能的开始.同时,对胎儿肺上皮干细胞进行分离培养时,应选择19周前的胎肺,以便获取较多的干细胞.二,两种肺泡上皮细胞在胎肺发育过程中几乎同时出现,我们没有发现向AECⅠ转化中的AECⅡ,提示它们可能来源于同一种祖细胞或干细胞,即被覆于终末细支气管和原始肺泡的内胚层来源的上皮细胞.三,TTF-1参与支气管树形态发生和肺泡的发育成熟,并调控AECⅡ及肺泡前体细胞SP-A和SP-B的分泌.在胎肺发育的过程中,AECⅡ虽然具备了分泌SP的能力,但大多以储存状态为主,或称为待分泌状态.胎儿出生以后AECⅡ受到肺泡充气、牵拉等动力学因素的刺激,可促使其快速分泌SP.四,随着未分化的肺上皮干细胞的分化成熟伴随着TTF-1表达的消失,说明从进化上来讲,成熟的肺上皮细胞均来自同一肺上皮的多能干细胞,而AECⅡ和clara细胞中的部分细胞保留了某些未分化细胞的特征,提示在AECⅡ和clara细胞中可能存在可充当成体干细胞的细胞亚群.五,在胎肺发育中hTERT的持续表达是肺干细胞或祖细胞维系其未分化状态和自我更新能力的重要标志,对保证支气管上皮和肺泡上皮细胞持续正常发育分化和再生,维持上皮组织的完整性起着重要的作用.利用hTERT的反应程度来鉴定肺上皮干细胞有较高的意义.六,CK-19作为上皮干细胞的标志物,在胎肺发育晚期中较多的表达于TAC,因此在鉴定肺上皮干细胞的作用上特异性较低,但有助于鉴别上皮源性和间充质来源的干细胞.七,nestin可能是一种特征性的蛋白在未分化的细胞中表达,是鉴定干细胞的较敏感标志物之一,在肺上皮细胞中nestin阳性细胞代表了一个特殊的细胞亚群,并且代表了一群未成熟细胞.八,该研究提示,从人胎儿肺组织中分离hTERT、CK-19和nestin阳性表达的上皮细胞进行体外培养、扩增和诱导分化具有一定程度的可行性和合理性.

目录

英文缩写词表

引 言

第一部分：人胎儿肺泡发育与上皮细胞分化的透射电镜观察

第二部分：甲状腺转录因子-1、SP-A和SP-B在人正常胎肺发育中的表达和意义

第三部分：人胎肺发育过程中肺上皮干细胞的初步鉴定

引言

分题一：端粒酶逆转录酶在人胎肺发育中的表达及意义

分题二：细胞角蛋白19在人胎肺发育中的表达及意义

分题三：巢蛋白及其mRNA在人胎肺发育中的表达及意义

结论

结语

图片说明

参考文献

综述 肺上皮干细胞的研究进展

主要仪器设备

博士在读期间已发表论文

致谢