深绿木霉对牧草促生作用及其作用机制研究

摘要

本文用具有拮抗作用的生防菌深绿木霉T2菌株(Trichoderma aureoviride)为试材，进行深绿木霉对牧草种子萌发和牧草促生作用、与根瘤菌互作反应及与禾草腐霉菌的对峙作用研究，以及深绿木霉对牧草中叶绿素、蛋白质含量的影响、深绿木霉对牧草中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(SOD)活性的影响。 1.不同浓度的深绿木霉孢子悬浮液对六种禾本科、豆科牧草草种的发芽率有不同的影响。结果表明：在原液(1×108个/ml)基础上稀释50倍(2×106个/ml)的孢子悬浮液浸种处理，对牧草种子的发芽率促进作用最为明显。其中，三叶草高出对照17％、黑麦草高出对照8.4％。并且，在25～30℃的温度条件、60～80％湿度条件、24h全黑暗条件下，促进萌发的效果最好。 2.不同浓度的深绿木霉发酵液处理中，100X(1×106个/ml)、200X(5×105个/ml)发酵液对供试的禾本科牧草和豆科牧草的种苗生长均有一定的促生作用。测量植株根长、苗长，结果显示：黑麦草100X苗长高出对照2.2％，根长高出对照3.3％、三叶草100X苗长高出对照1.3％，根长高出对照3.6％：称量植株干重，得出：黑麦草100X高出对照4％、三叶草100X高出对照2.3％。 3.深绿木霉对豆科有益根瘤菌的互作试验结果表明：深绿木霉对根瘤菌-百脉根中慢生根瘤菌(Mesorhizobium loti)无抑制作用；而深绿木霉对侵染禾草的瓜果腐霉菌(Pythium aphanidermatum(Eds.)Fitzp)抑制作用明显。对峙试验结果表明：深绿木霉生长迅速，对腐霉菌的拮抗作用明显。显微观察得出：深绿木霉抑制腐霉菌生长的作用方式为空间竞争和菌丝缠绕。 4.深绿木霉发酵液处理的牧草苗子蛋白质含量和叶绿素含量均影响。其中100X(1×106个/ml)发酵液处理中叶绿素和蛋白质的含量高出对照最为明显：禾本科牧草黑麦草在100X处理中的蛋白质含量达到1.64055mg/g(对照为0.89789 mg/g)，叶绿素含量为3.1836 mg/g鲜样(对照为)1.7176 mg/g鲜样；豆科牧草三叶草100X(1x106个/ml)处理的蛋白质含量达到1.546mg/g(对照为0.8772 mg/g)，叶绿素含量为2.65125mg/g鲜样(对照为2.32166 mg/g鲜样)。 5.深绿木霉对牧草中与植物抗病性密切相关的多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性有较大影响。试验结果表明：经过深绿木霉发酵液处理的牧草中各酶活性均较对照高。高浓度的原液、50X处理中各酶活性的峰值出现较早，相对对照的变化更明显，且在接下来会有较小的回升现象。低浓度的100X和200X峰值出现较原液和50X的较晚。其中PAL的活性变化更敏感。

目录

文摘

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声明

引言

第一章文献综述

1.1研究现状

1.2木霉菌的特点

1.2.1广谱性

1.2.2多机制性

1.3木霉防治病害的效果

1.4木霉在植物病害生物防治中的研究与应用前景

1.5植物中过氧化物酶(POD)研究进展

1.5.1过氧化物酶在植物抗病性中的研究

1.5.2过氧化物酶在木质素合成中的作用

1.6植物中多酚氧化酶(PPO)研究进展

1.6.1多酚氧化酶(PPO)酶学特征

1.6.2多酚氧化酶(PPO)在植物抗病性中的作用

1.7植物中苯丙氨酸解氨酶(PAL)研究进展

1.7.1在细胞分化和木质化中的作用

1.7.2在植物色素形成过程中的作用

1.7.3在植物根瘤形成过程中的作用

1.7.4在植物抗逆境中的作用

1.8植物中叶绿素研究进展

第二章深绿木霉对豆科及禾本科牧草的促生作用

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果分析

2.1深绿木霉孢子悬浮液对牧草发芽率、根长、芽长、幼苗干重、发芽指数、活力指数的影响

2.2不同条件对牧草种子发芽促生作用的影响

2.3不同浓度木霉发酵液土壤处理对牧草根长、苗长的影响

3.讨论

3.1深绿木霉的促生作用

3.2不同浓度的深绿木霉孢子悬浮液对草种发芽的影响

3.3不同浓度深绿木霉发酵液对牧草的促生作用

第三章深绿木霉对豆科根瘤菌及禾草腐霉菌作用研究

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果分析

2.1深绿木霉与根瘤菌对峙结果

2.2深绿木霉与腐霉菌对峙结果

2.3深绿木霉与腐霉对峙显微观察

3.讨论

3.1深绿木霉与根瘤菌的互作

3.2深绿木霉对禾草腐霉菌的抑制作用

第四章深绿木霉对牧草叶绿素和蛋白质含量的影响

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果与分析

2.1深绿木霉发酵液对牧草叶绿素含量的影响

2.2深绿木霉发酵液对牧草中蛋白质含量的影响

3讨论

3.1测定牧草中叶绿素含量

3.2测定牧草中蛋白质含量测定

第五章深绿木霉发酵液对牧草中三种抗酶活性的研究

1.材料与方法

1.1材料

1.2方法

2.结果与分析

2.1深绿木霉发酵液对牧草中多酚氧化酶(PPO)活性的影响

2.2深绿木霉发酵液对牧草中过氧化物酶(SOD)活性的影响

2.3深绿木霉发酵液对牧草中苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活性的影响

3.讨论

3.1过氧化物酶(SOD)

3.2多酚氧化酶(PPO)

3.3苯丙氨酸解氨酶(PAL)

第六章主要结论及创新点

6.1主要结论

6.1.1对豆科及禾本科牧草的促生作用

6.1.2对豆科根瘤菌及禾草腐霉菌的作用

6.1.3对牧草中蛋白质含量及叶绿素含量的影响

6.1.4对牧草中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(SOD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性的影响

6.2创新点

6.2.1深绿木霉对牧草的促生作用

6.2.2深绿木霉对牧草中防御酶活性的影响

参考文献：

致谢

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